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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 2kFP;7FO  
    @Ps1.  
     'H1k  
                                                                           EPEn"{;U  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 J$yJ2G  
    5J6~]J  
    任务说明                                                                           u6*0% Km  
    M(Yt9}Z%Y  
     tRTJQ  
    {-)I2GJav  
    多重光源                                                                           _J_QB]t  
       ?ViU%t8J5  
    z{U^j:A  
     ;![rwra  
    螺旋相位板                                                                           ~ =$d>ZNQ  
    (^)(#CxO  
     _xo;[rEw8  
    .H86f !=  
    探测器插件                                                                           #\3X;{  
    wJWofFz  
     N8{ 8 a  
    >#5jO9  
    参数运行 lMjeq.5nP  
    (S63:q&g  
                                                                                 ,GF(pCZzG  
    @dhnpR :L  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： R'B-$:u  
    ,Y0qGsV  
    Usage of the Parameter Run Document zi+NQOhR  
                                                                                     G,@ Jo[e  
    非时序建模 VO,F[E~_  
    =n_>7@9l  
                                                                               Rw`64L_  
    j<d,7  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 )H*BTfmt  
    e,@5`aYHM@  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing D.x&N~-  
                                                                                     F%:o6mT  
    总结 – 组件…           .oe\wJS6  
    <s (o?U  
                                                                     C ?aa)H  
    /}3I:aJwb  
    cx*$GaMk  
     k6|/ik9C  
    系统观感 AXPdgo6  
    XlxM.;i0H  
                                                                         Xcci)",!  
    zQsW*)L  
    ce1U}">11  
    发射&损耗激光 ?s9f}>  
    d PF*G$  
                                                                                 ?p &Xf>K  
    'LLpP#(  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 m=D9V-P  
    VJ-To}  
                                                                                     iY3TB|tMt  
    3D STED 轮廓 X GDJCN  
    "V<7X%LIX  
                   #i-b|J+%  
                                                             RWXN  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 L=kETJ:g  
    n@//d.T  
    受激发射损耗效应                                                                           &nwk]+,0W#  
    Z" dU$ ,n  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 VI8/@A1Gv  
    .;%`I  
    E5t /-4  
     *30T$_PiX|  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           H:,Hr_;nC  
    'OsRQ)E  
     -@mcu{&  
                                                                                     &*o{-kw  
     
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