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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 BD#;3?|  
    [te7 uZv-  
     DkKD~  
                                                                           w>Sz^_ h  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 \^LR5S&  
    !`=?<Fl  
    任务说明                                                                           g|_*(=Q  
    :P"Gym  
     ppP?1Il`kb  
    .Q)"F /  
    多重光源                                                                           {Dq51  
       P`"DepeD  
    to=##&ld<  
     3*JybMo"  
    螺旋相位板                                                                           H,~In2Z  
    obolDh a  
     [KJL%u|8/  
    bM3e7olWS  
    探测器插件                                                                           ra2q. H  
    r=aQ S5  
     O_Q,!&*6  
    :|3 C-+[  
    参数运行 e'&{KD,-T  
    h8Si,W 3o  
                                                                                 \c}r6xOr  
    V%=t2+  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： .utL/1Ej  
    ?%ntO]  
    Usage of the Parameter Run Document )D*xOajo+l  
                                                                                     ?3N86Qj  
    非时序建模 EtGr& \,  
    Mv =;+?z!  
                                                                               z\ pT+9&  
    &,7(Wab  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ~vF o 0k(  
    7^=jv~>wP  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing M-|2W~YU  
                                                                                     _4Pi>  
    总结 – 组件…           mJ7kOQ-.$  
    Njjeg9f  
                                                                     )wd~639U  
    r |/9Dn%  
    S~Q";C[&  
     9~I WGj?  
    系统观感 b@hoH)<9E  
    kGP?Jx\PkH  
                                                                         8 K!a:{  
    $@;[K \  
    PQr N";+  
    发射&损耗激光 (tN$G:+")F  
    @oNrR$7  
                                                                                 C:{'0m*jKs  
    Q2JjBV<  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 m(Ynl=c  
    rfoCYsX'  
                                                                                     "RA$Twhj  
    3D STED 轮廓 o+&sodt|`  
    k$!&3Rh  
                   w"|c;E1;_  
                                                             gEu\X|7'  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 6:pN?|=6X  
    v%^H9aK_  
    受激发射损耗效应                                                                           B#yyO>0k]  
    z16++LKmM  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 K<tg+(3  
    bX1ip2X lk  
    C7PiuL?  
     +qec>ALAg  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           w?q"%F;/  
    :e;fs.C  
     #Uu"olX7  
                                                                                     psVRdluS   
     
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