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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 2(k m]H^  
    x}~Z[bx  
     NtNCt;_R7  
                                                                           \3T[Cy|5|  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 S;j"@'gz9  
    rN'8,CV  
    任务说明                                                                           L cTTfb+<  
    0IyT(1hS  
     r0s(MyI  
    %wco)2  
    多重光源                                                                           N<XMSt  
       :A+}fB IN  
    Kf#iF*  
     K!(hj '0.  
    螺旋相位板                                                                           7c83g2|%   
    VNwOD-b/]  
     iL|5}x5\  
    hE7rnn{  
    探测器插件                                                                           SN]Na<P  
    :}CcWfbT  
     jB,VlL  
    S@Aw1i p  
    参数运行 &q +l5L"  
    qq"0X! w  
                                                                                 <vt}+uMzXv  
    Ro=dgQ0:t  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： B:ugEAo_  
    q4g)/x%nc  
    Usage of the Parameter Run Document AWg'J  
                                                                                     4'"WD0  
    非时序建模 ~-UO^$M-  
    .:O($9^Ho  
                                                                               [-Xah]g  
    :mhO/Bx  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Ymf@r?F<  
    3`;1;T2$B  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing T(Ji%S >  
                                                                                     6?a z  
    总结 – 组件…           +Jm[IN  
    tAkv'.  
                                                                     T.W^L'L `  
    ~=9S AJr]  
    `6(Zc"/ \m  
     VO~%O.>  
    系统观感 39L_O RMH  
    @}pcj2K#  
                                                                         .)<l69ZD Z  
    7rG+)kHG  
    *JAC+<~d  
    发射&损耗激光 '(-H#D.oy'  
    R ^ZOcONd-  
                                                                                 + Y!:@d  
    dptfIBYc+  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 #Jt1AV  
    H;0K4|I  
                                                                                     @>&b&uj7T  
    3D STED 轮廓 D=K{(0{"/,  
    VQ8Fs/Zt!  
                   ^Jw=5 ImG  
                                                             >M0^R} v  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 6}~k4;'}A  
    )G-u;1rd  
    受激发射损耗效应                                                                           Sj o-Xf}  
    +S'm<}"1  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 .m.Ga|;  
    D5:|CMQ  
    Z?'?|vM  
     nw#AKtd@x  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           PXML1.r$Q  
    VVcli*  
     K_k'#j~*?  
                                                                                     F'CJN$6Mw/  
     
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