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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 xOdL ct  
    tW"s^r=95  
     z9ZS& =>  
                                                                           k;pU8y6Y  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 u^+ (5|  
    0oo*F  
    任务说明                                                                           *DPKV$  
    zd?uMq;w  
     AJ)N?s-=  
    |#x]/AXa0/  
    多重光源                                                                           hpz DQ6-Y  
       Rj~y#m  
    0<42\ya  
     GW!%DT  
    螺旋相位板                                                                           4 |xQQv  
    1'SpJL1u~  
     y.?Q  
    9RJFj?^"  
    探测器插件                                                                           ;  8u5  
    d?>pcT)G_  
     48[b1#q]  
    VpWpC&  
    参数运行 2[5z6oG  
    xQ\S!py-  
                                                                                 og8"#%  
    yI8 /m|  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： Rmh u"N/q  
    `bcCj~j  
    Usage of the Parameter Run Document 7:X@lmBz=  
                                                                                     4nGr?%>  
    非时序建模 },vVc/  
    XMm (D!6  
                                                                               y\}<N6  
    #5mnSky+s  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 G-W(giF;NO  
    8AIAv_ g  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 6Y/TqI[   
                                                                                     jjJ l\Vn  
    总结 – 组件…           - xQJY)  
    hdurT  
                                                                     BH^8!7dkT  
    q=_tjg  
    bTc'E#  
     a~O](/+p;  
    系统观感 PZSi}j/  
    JsbH'l  
                                                                         j8{,u6w)-  
    6D1tRo  
    6Z68n  
    发射&损耗激光 +@#k<.yqn  
    H&=3rkX  
                                                                                 O - N> X  
    Ol1P  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 vm`\0VGSW  
    !-Md+I_  
                                                                                     _:.'\d(  
    3D STED 轮廓 cS#m\O  
    MU5#ph  
                   G~`nLC^Y  
                                                             @-5V~itW  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 b2HHoIT  
    6yPh0n  
    受激发射损耗效应                                                                           i`HXBq!|w  
    xgv&M:%D-  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 oM)4""|  
    $sBje*;  
    iXFN|ml  
     b1frAA  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           e8$OV4X  
    _0=$ 2Y^  
     Nlfz'_0M  
                                                                                     O5?3 nYHa  
     
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