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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 Md0`/F:+2  
    vs>Pd |p;  
     cYvt!M\ed  
                                                                           Z{gDEo)  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 W)^%/lAh  
    efuiFN;  
    任务说明                                                                           P~V ^Efz{  
    1ed^{Wa4$9  
     IpM"k)HR  
    )(rr1^Xer  
    多重光源                                                                           lk` |u$KPz  
       D~TlG@Pq  
    =@&>r5W1  
     [!Djs![O  
    螺旋相位板                                                                           F&C< = l\X  
    '+GY6Ecg  
     3#aLCpVla  
    /`t}5U>S_  
    探测器插件                                                                            ~fs} J  
    brK7|&R<  
     X5-[v(/]  
    ].Ra=^q  
    参数运行 t3*.Bm:^  
    F6\4[B  
                                                                                 9Z"WV5o  
    f(\S +4  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： />uE)R$  
    m8eoD{  
    Usage of the Parameter Run Document xZ* B}O{{H  
                                                                                     /XNC^!z6Js  
    非时序建模 } Fli  
    "D:?l`\o  
                                                                               Ir(U7D  
    LMN`<R(q]  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 b8[ ayy  
    muDOY~.  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing aCi)icn$  
                                                                                     sQ&<cBs2  
    总结 – 组件…           I|2dV9y  
    `Gx 5=Bm;  
                                                                     "Y"`'U=v  
    h\5~&}Hp  
    *g9VI;X  
     A+}O~,mxP8  
    系统观感 DcC|oU[  
    L-m' #  
                                                                         ZTj!ti;5  
    rT[b ^l}  
    Fh&USn"  
    发射&损耗激光 ]vw%J ^7:a  
    _bv9/#tR  
                                                                                 F^lau f  
    x]608I T  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 0IHAoV60  
    {$7vd  
                                                                                     HcV,r,>e  
    3D STED 轮廓 ~wcp&D  
    w}M)]kY  
                   bU}l*"  
                                                             ^rGuyW#  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 *ozXilO  
    f:AfMf>m  
    受激发射损耗效应                                                                           o*[[nK*fL  
    VkId6k:>6C  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 e5w0}/yW/  
    ]w]:9w  
    _^$F^}{&  
     p77=~s  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           1l^ `  
    k`\L-*:Ji  
     er@.<Dc  
                                                                                     >#`{(^  
     
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