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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 R& HkWe  
    D+4$l+\u  
     W`jKe-jF  
                                                                           R9~c: A4G  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Rw`64L_  
    *7yrm&@nG  
    任务说明                                                                           f;3k Yh^4  
    N9PEn[t@  
     @F!oRm5  
    :i o[9B [  
    多重光源                                                                           eeOG(@@o(  
       tAS[T9B  
    sbq:8P#  
     h"ATRr^  
    螺旋相位板                                                                           I=4G+h5p  
    qfgw^2aUa  
     Xcci)",!  
    8 v<*xy  
    探测器插件                                                                           D'"l%p  
    d{c06(#_  
     _#6*C%ax  
    F<Z13]|  
    参数运行 Ev1gzHd!i  
    ;^so;>F  
                                                                                 l }]"X@&G  
    xPP]RoPR  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： "V<7X%LIX  
    (iu IeJ^Z  
    Usage of the Parameter Run Document 'TDp%s*;  
                                                                                     Y]+KsiOL  
    非时序建模 8:"s3xaO3  
    Jr,**,wA  
                                                                               r<_qU3Eaj  
    Gs(;&fw  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 _/h<4G6A  
    $&. rS.*  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing #8a k=lL  
                                                                                     j.SE'a_  
    总结 – 组件…           d+&w7/F  
    LTnbBh*mc  
                                                                     @eN,m {b  
    +Sg+% 8T  
    ;^  YpQP  
     ;~Q`TWC  
    系统观感 q$jwH] .  
    a]0hB:  
                                                                         iq3TP5%i  
    dp*E#XCr1  
    He}"e&K  
    发射&损耗激光 C$`^(?iO/  
    dRXrI  
                                                                                 xgZ<. r  
    c) _u^Dh  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 (xMq(g  
    uUh6/=y  
                                                                                     hF9y^Hx4  
    3D STED 轮廓 !>6`+$=U  
    (%*~5%l\  
                   cs)R8vuB)z  
                                                             /7K7o8g  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 921s'"  
    3tCT"UvTD  
    受激发射损耗效应                                                                           X9ec*x  
    +D M,+{}  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ez[$;>  
    OTmr-l6  
    DN|+d{^lN  
     mJME1#j$/|  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           )4jS}  
    @Zfg]L{Lr  
     x=V3_HI/}  
                                                                                     N`7+] T  
     
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