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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 UmcPpZ  
    9aFu51  
     ~oy =2Q<Z  
                                                                           $014/IB  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 `+[Ct08  
    s4/4o_[W  
    任务说明                                                                           OOn{Wp  
    V}o`9R@tx}  
     8i/5L=a"`  
    sygxV  
    多重光源                                                                           ?zGx]?1P1<  
       'hN_H}U  
    :rd{y`59>&  
     T^> ST  
    螺旋相位板                                                                           y_boJ  
    GX?R# cf  
     +e}v) N  
    p'{B|ujj6  
    探测器插件                                                                           lZ|+.T!g?  
    Yl4XgjG  
     MwbXZb{#"=  
    >W Tn4SW@  
    参数运行 $`,10uw  
    .}!"J`{ W  
                                                                                 q{T [|(!  
    A!B: vJ  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 4&%0%  
    OSreS5bg  
    Usage of the Parameter Run Document C+o1.#]JM  
                                                                                     WxLbf +0o  
    非时序建模 E/[>#%@i  
    O(x1Ja,&  
                                                                               1T&NU  
    Rp.42v#ck  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 9U~fc U6  
    !\|_,pSB  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing o;#:%  
                                                                                     x*>@knP<-  
    总结 – 组件…           #uTNf78X  
    4z<nJOEh[  
                                                                     >TI/W~M  
    e1cqzhI=nA  
    XhEZTg;  
     B&:9uPRzZ  
    系统观感 6Qtyv  
    kU :ge  
                                                                         ` 1Ui  
    NM FgCL  
    dfy]w4ETB  
    发射&损耗激光 <pA%|]  
    2{U5*\FhVX  
                                                                                 N+lhztYQ?  
    we:P_\6  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 mVXwU](N  
    HxUJ 0Q  
                                                                                     P^(uS'j)+  
    3D STED 轮廓 u~rPqBT{d3  
    8'WoG]E_  
                   ql/K$#u  
                                                             {CH5`&  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 DpCe_Vb%M  
    +{~ cX] |  
    受激发射损耗效应                                                                           ;t~Y>,  
    SfSWjq  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 W3+;1S$k  
    )7c/i+FsC  
    mzO5&h7  
     q$7w?(Lk  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           953GmNZ7  
    !LR9}Xon  
     >O]u4G!  
                                                                                     D :)HK D.  
     
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