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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 .Iv`B:4  
    BXUd i&'O  
     xhncQhf\  
                                                                           [q(}~0{"-  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 5 $. az  
    J|e3 UikA  
    任务说明                                                                           /X?%K't2r  
    $%5vJiuk  
     Ss'Dto35Q  
    >&)|fV&4  
    多重光源                                                                           k j&hn  
       ^- s`$lTp  
    &[ $t%:`  
     [`bA,)y"  
    螺旋相位板                                                                           @gm!D`YL  
    Gvqu v\  
     slV]CXW)t  
    ]9hhAT44  
    探测器插件                                                                           Uk4G9}I  
    aY\(R02B  
     cd)}a_9  
    I<hMS6$<LE  
    参数运行 3s_$.  
    M3H^s_  
                                                                                 HLl"=m1/>  
    13/U4-%b2  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： `5Em: 8 M  
    5>rjL ;  
    Usage of the Parameter Run Document c~ Q 5A  
                                                                                     BU=Ta$#BZ  
    非时序建模 kTo{W]9]  
    ]wV_xZ)l^A  
                                                                               )7a 4yTg!~  
    ?#  )\SQ  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 `B7?F$J  
    #=I5_u  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing \7 }{\hY-  
                                                                                     XF99h&;9  
    总结 – 组件…           oN Rp  
    t flUy\H>  
                                                                     iU4Z9z!  
    p.!p6ve){  
    VBe&of+  
     gdG#;T'  
    系统观感 ~lH2# u>g  
    _ Zzne  
                                                                         .< -~k@ P  
    Lq{/r+tt/  
    dt(Lp_&v  
    发射&损耗激光 ux>LciNq  
    /4,U@s)"/  
                                                                                 ib~EQ?u{  
    \$2zF8  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 =}[m_rp&  
    z2OXCZ*/  
                                                                                     Z4tc3e  
    3D STED 轮廓 K=!?gd!Vw  
    q:G3y[ P  
                   B{lL}"++0  
                                                             wKAxUPzm  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 5!7vD|6  
    (:|1h@K/R  
    受激发射损耗效应                                                                           N#7_)S[@0l  
    LH>h]OTQF  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 *|)O  
    bs_rw+  
    }r:8w*4 7  
     "Kf4v|6;  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           :c0 |w  
    +fG~m:E  
     (eO_]<wmky  
                                                                                     V-z F'KI[  
     
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