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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 tngB;9c+w  
    qWheoyAB  
    DOJydYds  
                                                                      
    qsp.`9!  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 88v8lt;R  
    vvv'!\'#  
    任务说明                                                                           dEtjcId  
    d,Aa8I  
    qIQ=OY=6  
    ;,[0bmL  
    多重光源                                                                           h'-4nu;*  
       iVn4eLK^v  
    W+!UVUpW  
    XqmB%g(  
    螺旋相位板                                                                            C7ivA h  
    HK/WO jr  
    E+O{^C=  
    PiKP.  
    探测器插件                                                                           [[IMf-]  
    uKP4ur@1  
    z;>$["t]6  
    _GG\SWm  
    参数运行 q k^FyZ<  
    ]qT&6:;-]  
                                                                            
    4-.K<-T%D  
    CVa>5 vt  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: ~r.R|f]IQ  
    ^1.*NG8  
    Usage of the Parameter Run Document E)$>t}$  
                                                                                     mp8GHV  
    非时序建模 (p%|F`  
    -j3Lgm  
                                                                          
    i7.8H*z'  
    V+"%BrM  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 JLE&nbKS  
    {oqbV#/&  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing M9W zsWM  
                                                                                     +-@n}xb@  
    总结 – 组件…           R|C`  
    L5FOlzn  
                                                                
    1p. c6[9 -  
    rQimQ|+  
    cpjwc@UMe  
    ,~d0R4)  
    系统观感 ?.VKVTX^  
    F<I*?${[  
                                                                    
    n>ui'}L  
    d^}p#7mB\  
    #h[>RtP:  
    发射&损耗激光 R!j#  
    o0R?vnA=  
                                                                            
    ,-e}X w9  
    h~k<"  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 src9EeiV  
    !l $d^y345  
                                                                                     $yASWz  
    3D STED 轮廓 YbP @  
    c#N4XsG,  
                   ZG^<<V$h  
                                                        
    s?EQ  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 :VT%d{Vp_  
    G JRl{Y  
    受激发射损耗效应                                                                           :8)Jnh\5  
    #BLHHK/[  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 .|O T#"LP  
    ;W?#l$R  
    '. "_TEIF  
    zo ?RFn  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           _c>ww<*3  
    k77IXT_7u  
    d0 )725Ia  
                                                                                     A'jvm@DvQI  
     
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