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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 !x9j~D'C`  
    MxiU-  
     :j/PtNT@  
                                                                           J90q\_dY.  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 K7&A^$`  
    ? C2 bA5 M  
    任务说明                                                                           _q([k_4h  
    Fjc+{;x  
     :=#*[H  
    #&\hgsw/T  
    多重光源                                                                           p9<OXeY   
       ]y 6`9p  
    ZIAiVq2)  
     x>Ah4a d  
    螺旋相位板                                                                           rVkoj;[  
    G+ =6]0HT  
     %g(h%V9f  
    (sw1HR  
    探测器插件                                                                           H[%F o  
    Mj$dDtw  
     t#|E.G:=  
    lv}U-vK  
    参数运行 ?r@euZ&  
    r;w_B%9  
                                                                                 z;x `dOP  
     l;>#O  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： N$ZThZqqv  
    8eP2B281  
    Usage of the Parameter Run Document ~MY7Ic%  
                                                                                     /qF7^9LtaY  
    非时序建模 dJ`Fvj  
    |0w'+HaE~N  
                                                                               R~b9)  
    HSx~Fs^J  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 my")/e  
    bIizh8d?  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 9#%(%s 2 +  
                                                                                     w_^&X;0^  
    总结 – 组件…           %dZD;Vhg  
    .Gl&K|/{j  
                                                                     |aN0|O2  
    <C6/R]x#  
     49 3ik  
     c%)uG _  
    系统观感 X.s? =6}g  
    }eb%"ZH4|  
                                                                         &F\J%#{  
    'xb|5_D  
    &+`l $h  
    发射&损耗激光 ,?B.+4CW\E  
    >4\V/ I  
                                                                                 K_`*ZV{r  
    !gy'_Y  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 uGl0z79  
     -/  
                                                                                     N(&FATZUW  
    3D STED 轮廓 *ILS/`mdav  
    XoSjYG(>,  
                   `#fOY$#XB  
                                                             g)$Pvfc  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 7OtQK`P"A  
    T9Vyj3!i_  
    受激发射损耗效应                                                                           q22cp&gmX  
    *U54x /w|  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 SX^fh.  
    dGIu0\J\$  
    d(wqKiGwe  
     w#F+rh3  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ,_rarU)[J  
    ?xQ lX%&`6  
     JIb<>X,  
                                                                                     &;)~bS(   
     
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