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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 L~=h?C<  
    7;5SK:X%dm  
     ;5M I8  
                                                                           :.J Ad$>P  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ?31#:Mg6g+  
    u8 Q`la  
    任务说明                                                                           G*JasHFs  
    /{|JQ'gqX  
     L3pNna  
    IZn|1X?}\s  
    多重光源                                                                           oP!oU2eqK  
       ,Y  ./9F  
    f@rR2xZoQ  
     RR |Z,  
    螺旋相位板                                                                           k> SPtiAs  
    hR(\%p  
     NU"Ld+gw  
    sYE|  
    探测器插件                                                                           _<}oBh  
    Z4KYVHD,  
     ]O]6O%.ao  
    L.X"wIs^  
    参数运行 LYhjI  
    j2^Vz{  
                                                                                 > >%m,F[  
    RA^6c![  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： |q!O~<H@  
     OXDEU.  
    Usage of the Parameter Run Document ;#)sV2F\&  
                                                                                     V96:+r  
    非时序建模 q|h#J}\  
    Tg/?v3M88  
                                                                               I'[gGK4 F  
    M$,4B  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 o@2Y98~Q}  
    eU(cn8/}  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing v-(dh5e` H  
                                                                                     `?=Y^+*!-  
    总结 – 组件…           tw k  
    f0M5^  
                                                                     BMi5F?Q'G  
    !KC4[;Y  
    y?OK#,j  
     T\v~"pMu*0  
    系统观感 (! a;}V<7  
    F,}7rhY(U^  
                                                                         zoibinm}Eg  
    Fa0Fl}L  
    .VXadgM  
    发射&损耗激光 ,eSII2,r4  
    F81Kxcs  
                                                                                 %_ (Xn  
    /JjSx/  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 PjE%_M<  
    *)bh6b=7  
                                                                                     -J":'xCP!  
    3D STED 轮廓 O%s7}bR3  
    pN=>q <]L  
                   j4%\'xj:  
                                                             d~qZ;uw  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ec h1{v\B|  
    |BEoF[1  
    受激发射损耗效应                                                                           ;q?WU>c{?  
    T-F8[dd^/  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 U_sM==~  
    +?'a2pUS  
    VXPs YR&  
     O^Y@&S RrQ  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           vyBx|TR  
    n #PXMD*  
     h9Tst)iRi  
                                                                                     &8HJ4Vj2  
     
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