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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 WZ-{K"56  
    bv"({:x  
     Ekp 0.c8:  
                                                                           6j![m+vo%  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 MNE)<vw>  
    p tfADG  
    任务说明                                                                           Q*o4zW  
    Lh$ac-Ct  
     GgZf6~b1J  
    9:5NX3"p  
    多重光源                                                                           $)a5;--W  
       u3!!_~6,z  
    \K=PIcH  
     U^S:2  
    螺旋相位板                                                                           c=E.-  
    QCnVZ" !(  
     ds[~Cp   
    9Dkgu ^`  
    探测器插件                                                                           \"j1fAD!  
    t $%}*@x7  
     Ki\jiflc7  
    88U  
    参数运行 ]&BFV%kw  
    l8li@K  
                                                                                 DzOJ{dF  
    *xKR;?.  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： _~<TAFBr  
    ^<b.j.$<z  
    Usage of the Parameter Run Document ^el:)$  
                                                                                     EFOQ;q  
    非时序建模 I[C.iILL  
    0nn# U  
                                                                               |%9~W^b  
    Dn! V)T  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 sNTfRPC  
    1 crjRbi  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing w| # 79,&  
                                                                                     o4795r,jz  
    总结 – 组件…           .=D6<4#t  
    b6VAyTa  
                                                                     '93&?  
    O;tn5  
    4 .qjTR  
     }=)"uv  
    系统观感 m 9Q{ )?J7  
    % M:"Ai5:  
                                                                         ? 'nMZ  
    2|EoP-K7  
    %J'_c|EQM  
    发射&损耗激光 A&#Bf#!G  
    }%|OnEk"  
                                                                                 ],m-,K  
    ,;}RIcvQV  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ~a Rq\fx{  
    {:cA'6f.b  
                                                                                     ?,[w6O*  
    3D STED 轮廓 wVB8PO8  
    x;/3_"$9>\  
                   B7C6Mau  
                                                             XO>Y*7rO  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 7Q&P4{hi0  
    oKiu6=  
    受激发射损耗效应                                                                           zyE yZc?  
    "tIx$?I  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 s,8%;\!C  
    a1&^P1.  
    ~Fh(4'  
     hR2.w/2j  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           eX/$[SL[  
    k5/}S@F8  
     w.jATMJ)F  
                                                                                     L K$hV"SYb  
     
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