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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 Ig'Y]%Z0  
    yrdJX  
     ":"QsS#*"#  
                                                                            / >Wh  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 MfJk`-%~  
    +>.plvZhu  
    任务说明                                                                           yH|ucN~k5S  
    Mw?nIIu(@  
     v>c[wg9P  
    f/Grem  
    多重光源                                                                           =9\=5_V  
       S&6}9r  
    b5_A*-s$M  
     UQ$dO2^  
    螺旋相位板                                                                           DGC -`z  
    V8NJ0fF  
     n8w|8[uV^  
    r4gkSwy  
    探测器插件                                                                           H'<9;bD -  
    'P)xY-15  
     w(J-[t118  
    +IuV8XT2(  
    参数运行 8!TbJVR  
    H+F?)VX}oA  
                                                                                 OZbwquF@  
    29Kuq;6  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： =oluw|TCe7  
    Z"lL=0rY/  
    Usage of the Parameter Run Document 1UJ(._0hR  
                                                                                     9u1_L`+b  
    非时序建模 =P'=P0G  
    {uM0J$P:  
                                                                               6O"Vy  
    ;G0~f9  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ~`#.ZMO  
    a,d\< mx  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing  .#zx[Io  
                                                                                     'an{<82i  
    总结 – 组件…           7Hf6$2Wh  
    |E53 [:p  
                                                                     0+/L?J3  
    #Jy+:|jJ  
    D?}LKs[  
     <!y_L5S|   
    系统观感 /Or76kE  
    J%aW^+O  
                                                                         3 cT  
    ;)83tx /  
    Z B`!@/3X  
    发射&损耗激光 kC01s  
    5`^"<wNI  
                                                                                 V3yO_Iqa  
    oMLpl3pl  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 &'WgBjP  
    n-Dr/c4  
                                                                                     YxS*im[%]  
    3D STED 轮廓 O_-.@uo./(  
    QDBptI:  
                   5iG|C ~  
                                                             5f/[HO)  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 OMJr.u  
    r;O{et't7y  
    受激发射损耗效应                                                                           ? @h  
    `WWf?g  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 xtpD/,2  
    E Q?4?  
    &|9mM=^  
     ;f?OT7>kN  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           vIN6W   
    6@H& S  
     U=Z@Ipu5T  
                                                                                     PA`b~Ct  
     
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