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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要  c(E{6g?  
    *NaB#;+|k`  
     rjAn@!|:+  
                                                                           l -mfFN  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 "'.UU$]d  
    9Cp-qA%t  
    任务说明                                                                           nFe<w  
    ?V.cOR`6  
     ]t,BMu=%  
    `pS9_ NYZ}  
    多重光源                                                                           |\t-g" ~sN  
       f:w?pE  
    XS{Qnx_#  
     JPUW6e07o  
    螺旋相位板                                                                           @4#c&h 3  
    4Uo&d#o)C-  
     7#a-u<HF"  
    rJT a  
    探测器插件                                                                           `r':by0M  
    EU;9 *W<  
      _,0  
    LEf^cM=>  
    参数运行 u@M,qo`  
    5`  ~JPt  
                                                                                 n\'4  
    XJ\DVZ  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： @ioJ] $o7  
    S Lj!v&'  
    Usage of the Parameter Run Document g2ixx+`?|:  
                                                                                     -20bPiM$A  
    非时序建模 {9pZ)tB  
    #x60xz  
                                                                               N!=v4f  
    ]|a g  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 OLGE!&!>  
    i$#;Kpb`^  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing [yQt^!;  
                                                                                     AKfDXy  
    总结 – 组件…           $GcqBg-Hi  
    C2I_%nU Z1  
                                                                     I6av6t}  
    -3 *]G^y2  
    #q$HQ&k  
     6;d*r$0Fc  
    系统观感 lgy <?LI\  
    ]Q1yNtN  
                                                                         Y\P8 v  
    ,R\ \%  
    "+nRGEs6  
    发射&损耗激光 lb3b m)@:  
    MJO-q $)c  
                                                                                 ltSU fI  
    d&Zpkbh"  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 lfgq=8d  
    Q&tG4f<  
                                                                                     o:'MpKm  
    3D STED 轮廓 & J'idYD  
    )2o?#8J  
                   V2EUW!gn 2  
                                                             t!l&iVWs  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 /36:ms A  
    Wvh#:Z  
    受激发射损耗效应                                                                           LonxT&"!D  
    a58H9w"u)  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 uH^-R_tQ  
    CK@@HSm}l  
    g:@#@1rB6  
     BDDlQci38  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ^{`exCwM x  
    T'9'G M  
     5C ]x!>kX  
                                                                                     0#hlsfc]\  
     
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