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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 yfS`g-j{~  
    1.]Py"@:  
     iPMI$  
                                                                           mbBd3y  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 taXS>*|B  
    TxYxB1C)  
    任务说明                                                                           9-DDly [)4  
    Kc=&jCn  
     @0q%&v0  
    K9FtFd  
    多重光源                                                                           uj$b/I>.'  
       t)74(  
    -Cxk#-sb#  
     d,|W  
    螺旋相位板                                                                           odPq<'V|AY  
    NZ `( d  
     A]2zK?|s  
    vcsi @!   
    探测器插件                                                                           lHwQ'/r  
    M3j_sd'N  
     KaC+x-%K  
    c+/SvRx^>  
    参数运行 bWK}oYB*  
    "Y 9 *rL  
                                                                                 ~Rx[~a  
    d#.9!m~.  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： |q5R5 mQ  
    AD4KoT&  
    Usage of the Parameter Run Document jE.U~D)2YF  
                                                                                     'G3B02*  
    非时序建模 z#*w Na&@[  
    [k(oQykq  
                                                                               @cNX\$J  
    'v&k5`Qq  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 az~4sx$+}  
    ,Y EB?HA  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing >Liv].  
                                                                                     }3cOZd_,t  
    总结 – 组件…           Q_'3}:4  
    [^B04x@  
                                                                     &Ib8xwb:  
    f{[U->#^  
    iCCY222:  
     ~WK>+T,%  
    系统观感 QT/TZ:  
    0n+Wv @/  
                                                                         b(dIl)Y4 :  
    }!b9L]  
    _B)LRD+Hj  
    发射&损耗激光 s8 .OL_e  
    LUv>0G#L[  
                                                                                 Q+E%"`3V4l  
    !.mMO_4}  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 IB:Wh;_x  
    oop''6`C%  
                                                                                     stz1e dP  
    3D STED 轮廓 ,JyE7h2%i  
    ?y!0QAIXK  
                   j8?z@iG  
                                                             DYJ@>8  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 E^_P  
    w1EYXe  
    受激发射损耗效应                                                                           wxEFM)zr  
    )s(J8J[b*L  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ET1/oG<@  
    HJ]\VP9Zb  
    ^?(A|krFg  
     lq=| =  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ,T?8??bZ  
    n.p6+^ES  
     #>dfP"}&,  
                                                                                     ]kx)/n-K  
     
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