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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 NcVsQV  
    ".=LzjE<gv  
     nR()ei^X  
                                                                           `AO<r  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 /V% ]lmxQ  
    djxM/"xo  
    任务说明                                                                           J/o$\8tiMw  
    P4~=_Hh  
     p>c`GDU  
    0D*uZ,oBEw  
    多重光源                                                                           sivd@7r\Fa  
        t=;84lA  
    az=(6PX  
     I )LO@  
    螺旋相位板                                                                           1>!wm0;x  
    7w U$P  
     -#nfO*H}  
    {ta0dS;1  
    探测器插件                                                                           YsHZFF  
    i(k]}Di:  
     c T!L+z g  
    DrTo")T  
    参数运行 $j\UD8Hj'-  
    27NhYDo  
                                                                                 $YM6}D@  
    y+P iH  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： c&o|I4|Y,  
    N2~q\BqA  
    Usage of the Parameter Run Document Ve1O<i  
                                                                                     aB(6yBBoxj  
    非时序建模 > WsRCBA  
    y<<:6OBj  
                                                                               %qM3IVPK)q  
    v .ftfL!  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 [uh$\s7  
    _(q|W3  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing RQ1`k,R=  
                                                                                     V|h/a\P  
    总结 – 组件…           u{o!j7  
    E!eBQ[@  
                                                                     73C  
    2A+I8/zRG  
    ~$zodrS9  
     $1CAfSgKw  
    系统观感 t1)~J  
    JERWz~n}  
                                                                         =DhzV D  
    gGiLw5o,  
    \y-Lt!}  
    发射&损耗激光 M=}vDw]Q  
    2{!^"iW  
                                                                                 zlh}8Es  
    9*@Kl`\  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ;(kU:b|j  
    AU@XpaPWh  
                                                                                      4I> I  
    3D STED 轮廓 0#}@- e  
    _%)v9}D  
                   v;9VX   
                                                             NC*h7  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ^XV=(k;~bX  
    M. Fu>Xi  
    受激发射损耗效应                                                                           QPi]5z?  
    Lmy ^/P%  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 *S).@j\{W  
    By t{3$  
    M~/%V NX  
     HqW|  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           rKDMIECrm  
    %}U-g"I  
     ~ituPrH%<  
                                                                                     QES[/i +  
     
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