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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 N*&1GT#9  
    'X2POay1  
     u-5{U-^_  
                                                                           Q)[C?obd v  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Per1IcN  
    3kMf!VL  
    任务说明                                                                           )%@J=&G8TT  
    t1y4 7fX6  
     ]wG{!0pl  
    *ppffz  
    多重光源                                                                           Tyf`j,=  
       6b \&~b@T  
    'ub@]ru|  
     A=wh@"2  
    螺旋相位板                                                                           ';=O 0)u  
    %Qdn  
     K&KWN]  
    R[x_j  
    探测器插件                                                                           }d}Ke_Q0  
    wx0j(:B]  
     7Da`   
    b?QoS|<e?  
    参数运行 lv+TD!b   
    |2n4QBH!  
                                                                                 "mvt>X  
    BeoDKdAwY  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： [}0haTYc4  
    -fHy-Oh  
    Usage of the Parameter Run Document Y^EcQzLw  
                                                                                     U0N 60  
    非时序建模 @8r pD"x  
    aH/ k Ua  
                                                                               o]M5b;1  
    <s<n  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 O*)Vhw'pK  
    PKg@[<g43  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing |_aa&v~  
                                                                                     &H/'rd0M  
    总结 – 组件…           .Od !0(0  
    T&u5ki4NE  
                                                                     uH- l%17  
    ::{Q1F  
    ieCEo|b  
     B; h"lv  
    系统观感 >rKIG~P_  
    CxOob1@  
                                                                         mQ 26K~  
    UJ7*j%XQz_  
    EC!02S  
    发射&损耗激光 Hp!-248S  
    E GU 0)<  
                                                                                 tq6!`L}3  
    0 e ~JMUb  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 :Cs4NF   
    'UX!*5k<:  
                                                                                     Y}|X|!0x  
    3D STED 轮廓 F {4bo$~>  
    >T3-  
                   Nk VK  
                                                             &n}f?  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 %JD,$p Ps  
    VfC<WVYiZ  
    受激发射损耗效应                                                                           }DfshZ0QM  
    *>'V1b4}  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 $f=J2&D,Cz  
    jaMjZp;{(  
    f:|1_j  
     q{I%Q)t)gU  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           cyv`B3}  
    {Y=WW7:Qx  
     )SRefW.v  
                                                                                     bj0G5dc=  
     
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