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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 "Z~`e]>  
    n1?}Xq|  
     OpqNEo\  
                                                                           nuxd S ,  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Cya5*U0=  
    PY -+Bf  
    任务说明                                                                           {,Fcd(MU  
     0Ve%.k  
     df ?eL2v  
    <`+zvUx^?  
    多重光源                                                                           eJ:Yj ~X`<  
       y;:]F|%<  
    1MV@5j  
     lC2?sD$  
    螺旋相位板                                                                           ?[|hGR2L  
    zp#:EZ  
     ^9'$Oa,*  
    h ~fWE  
    探测器插件                                                                           L~ 2q1  
    x;mJvfX  
     w%rg\E  
    v~`*(Hh  
    参数运行 Xy!&^C` J`  
    (Com,  
                                                                                 f@x_#ov  
    esteFLm`6  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： )Oe`s(O@[I  
    VWD.J  
    Usage of the Parameter Run Document uOFnCy 4  
                                                                                     K plM['uF  
    非时序建模 S\b K+  
    wibwyzo  
                                                                               e2bLkb3c  
    "qgu$N4/>  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 hv{87`L'K(  
    zv@bI~3~  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing &M= 3{[  
                                                                                     #!L%J<MX  
    总结 – 组件…           0+|>-b/%  
    IhwN],-V  
                                                                     >fg4x+0%  
    -)6;0  
    (FG^UA#'  
     ]<q'U> N  
    系统观感 (,U7 R^  
     ;b|  
                                                                         o"\{OX  
    L&'l3|  
    KD=bkZ&  
    发射&损耗激光 ?^F5(B[+Y  
    k{1b20  
                                                                                 ?lyltAxs'  
    M2L0c?  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ]$|st^Q  
    {?y<%@  
                                                                                     r*]uR /Z$  
    3D STED 轮廓 )\"I*Jwir  
    &\c5!xQ9*  
                   s_v }=C^  
                                                              VmYBa(  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 A-;^~I  
    58PKx5`D  
    受激发射损耗效应                                                                           w_GLC%|7  
    4/f[`].#W  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 97(n\Wt 2  
    jP7w6sk E  
    SKW;MVC  
     _\!0t  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           @~hz_Nm@8  
    Q<C@KBiVE  
     7G2vYKC'  
                                                                                     ff[C'  
     
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