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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 *K{-J*   
    muAI$IRR   
     BD)5br].  
                                                                           jLANv{"  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 E@/yg(?d=  
    }`O_  
    任务说明                                                                           Z*Sa%yf  
    ~f.fg@v`+v  
     B=>:w%<Ii  
    ^yO+-A2zC  
    多重光源                                                                           v4?qI >/  
       igoXMsifT+  
    Ya#,\;dTT  
     n/ \{}9   
    螺旋相位板                                                                           9q?\F  
    x=UwyZ  
     1;; is  
    xKilTh_.6  
    探测器插件                                                                           nLA8Hy"8z  
    _I("k:E7  
     i2a""zac  
    uxGY/Zf  
    参数运行 mfYY?]A*+  
    =@98Gl9!  
                                                                                 j{.P'5e@pZ  
    To x{Sk3L  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： [d( @lbV0  
    :YL`GSl  
    Usage of the Parameter Run Document r%M.rYLG{  
                                                                                     &"D *  
    非时序建模 ?w{lC,  
    eXHk6[%[  
                                                                               (*.t~6c?5  
    Lo'P;Sb4<}  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 MwoU>+XB  
    (+@ Lnz\  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing X[Lwx.Ly8  
                                                                                     Q(P'4XCm  
    总结 – 组件…           `Qf$]Eoft  
    $=7'Cm ?  
                                                                     s 0}OsHAj  
    )2@_V %  
    v6gfyGCJ  
      2 EG`  
    系统观感 fl{wF@C6  
    c:  /Wk  
                                                                         byj}36LN62  
    ]K]$FX<f  
    ~$#"'Tl4J  
    发射&损耗激光 WaU+ZgDrG  
    8PQn=k9  
                                                                                 GpjyF_L  
    BPp`r_m8w}  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 0?)U?=>]p  
    8.-0_C*U;  
                                                                                     <kQ 5sG  
    3D STED 轮廓 X!}  t``  
    c7$L:  
                   JArSJ:}  
                                                             (!-gX" <b  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 [dG&"%5vD  
    ,o $F~KPu  
    受激发射损耗效应                                                                           sV8}Gv a  
    m/,.3v  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 "}_b,5lkGK  
    gWt}q-@nRR  
    1Sk=;Bic  
     T#;W5<"  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           `Yk~2t"V  
    nz72w_  
     #;9I3,@/Y  
                                                                                     c/l%:!A  
     
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