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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 03-17
    摘要 VGc*aQYa  
    {&n- @$?  
    j~k,d.17M  
                                                                      
    Nn[*ox#i  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 ks0Q+YW  
    +d6onO{8  
    任务说明                                                                           BA c+T  
    %]_: \!  
    [t?tLUg|6  
    o~~;I  
    多重光源                                                                           gB'ajX=OA/  
       !0,q[|m  
    ~a ([e\~  
    [7I bT:ph  
    螺旋相位板                                                                           e,xL~P{|  
    ~#sD2b` 0  
    =HCEUB9Fs  
    v0\l~_|H  
    探测器插件                                                                           2R&\qZ<  
    ']1n?K=A  
    r%.k,FzGZY  
    r @4A% ql<  
    参数运行 2t\0vV2)/O  
    &>zH.6%$  
                                                                            
    sG`x |%t  
    \jiE :Qt  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: OT 0c5x  
    G4@r_VP\  
    Usage of the Parameter Run Document Z\nDR|3  
                                                                                     5bLNQz\WJ  
    非时序建模 7[1Lh'u  
    #dZs[R7h  
                                                                          
    mXRkR.zu+  
    L BbST!  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ZM.'W}J{ *  
    = -2~>B  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing OIP]9lM$nC  
                                                                                     3(WijtH  
    总结 – 组件…           ?@rd,:'dE  
    <+k&8^:bi  
                                                                
    i1B!oZ3q  
    $,}jz.R@  
    }p~2lOI  
    7 9t E  
    系统观感 w5%Yi {  
    D~C'1C&W  
                                                                    
    `dZ|Ko%k  
    [|Qzx w9  
    aFTWzz  
    发射&损耗激光 x"b'Pmw  
    VRd7H.f,A6  
                                                                            
    MKBDWLCB  
    A8m06  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 UY(T>4H+h  
    \qG ?'Iy  
                                                                                     8&2 +=<Q~  
    3D STED 轮廓 pkn^K+<n,  
    Cy;UyZ  
                   c]^P$F8U  
                                                        
    9+@h2"|N4*  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 T-] {gc  
    Tc^ 0W=h  
    受激发射损耗效应                                                                           n\"6ol}>E  
    cw<I L  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 27SHj9I  
    Ev7.!  
    F rc  kA  
    (tg.]q_=u  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           tpJA~!mG3  
    Jq/itsg  
    DPI[~  
                                                                                     ` s7pM  
     
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