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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 +xL' LC x  
    Gh5 3 Pne  
     lNLa:j  
                                                                           r9Vt}]$aG  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。  .: Zw6  
    /B 53Z[yL  
    任务说明                                                                           jX7;hQ+P  
    s?JOGu  
     8kf5u#,'  
    j6d{r\!$4  
    多重光源                                                                           ms&6N']  
       **CGkL  
    A I v  
     84_Y+_9  
    螺旋相位板                                                                           W5uC5C*,l  
    "]bOpk T  
     YJ !jdE}  
    *x/H   
    探测器插件                                                                           gXj3=N(l  
    OI,F,4e  
     s-4qK(ml-  
    U6F7dT  
    参数运行 d" =)=hm!  
    l(pP*2  
                                                                                 %0zp`'3Y  
    1j]vJ4R_\  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： pK"iTc#\X  
    7*kTu0m  
    Usage of the Parameter Run Document E#E&z(G2  
                                                                                     O!'gylj/  
    非时序建模 C1uV7t*\  
    <M,<|Y*)  
                                                                               z:8ieJ)C  
    ]*X z~Ox2  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 l>T]Y  
    n0FzDQt26  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing Elt" tJ  
                                                                                     OWp`Wat  
    总结 – 组件…           ,:{+-v(  
    Us\Nmso z  
                                                                     e F(oHn,  
    uvRX{q 4  
    k/M{2Po+  
     kZ0z]Y  
    系统观感 JkEITuTth  
    KP`Pzx   
                                                                         B@ >t$jK  
    l\TL=8u2c  
    zCS&w ~  
    发射&损耗激光 wn.UjxX.  
    `NQ;|!  
                                                                                 09=w  
    `NyO|9/4  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 DB0?H+8t  
    ^SbxClUfw!  
                                                                                     >x]ir  
    3D STED 轮廓 Q]]M;(  
    4WPco"xH!  
                   bduHYs+rq  
                                                             KuF>2KX~Y  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 [sK'jQo-[1  
    Rl (+TE  
    受激发射损耗效应                                                                           9 RC:-d;;_  
    94?/Rhs5  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 hP_{$c{4:g  
    #@ F   
    9fYof  
     Knp}88DR^j  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ;)vs=DK:)  
    z"*3p8N  
     Xif>ZL?aXb  
                                                                                     (S_1C,  
    文件信息 `69xR[f  
    {>3w"(f7o  
    pS8`OBenA  
     }vZTiuzC  
    进一步阅读 'X~CrgQl  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     r@Xh8 r;  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy AgWG4C=  
    5*O]`Q7  
    市场图片 0IQ|`C.  
    sUZ2A1J}  
     ?SX0e(+}}  
     
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