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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 ta<8~n^?  
    R\Ckk;<$  
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    F(ZczwvR  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 ;U$Rd,T4S  
    y2mSPLw  
    任务说明                                                                           17`-eDd  
    ^go3F{; 4i  
    wCV~9JTJ!  
    Jl6lZd(Np  
    多重光源                                                                           bR1Q77<G\  
       X4!Jj *  
    ur7S K(#  
    rVRv*W  
    螺旋相位板                                                                           R,BINp  
    ms\\R@R  
    NTO.;S|2%  
    mg>wv[ 7  
    探测器插件                                                                           g_! xD;0  
    sl(go^  
    OEX\]!3_Fm  
    K`60[bdp  
    参数运行 +WKN&@  
    Ino]::ZJ/  
                                                                            
    V#+F*w?&D  
    .,U4 ATO  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: _3NH"o d  
    [@B!N+P5;  
    Usage of the Parameter Run Document aR'~=t&;z1  
                                                                                     FQE(qltf,  
    非时序建模 P}>>$$b\Yi  
    F-M)6&T  
                                                                          
    FFe{=H,=  
    (_+ux1h6^  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 -N6ek`  
    e 'F:LMX  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing V]"pM]>3X  
                                                                                     =P_ *.SgR  
    总结 – 组件…           O3%#Q3c>3  
    vS[\ j  
                                                                
    rY&#g%B6Fp  
    R~|(]#com  
    feeHXKD|  
    G )`gn  
    系统观感 -v|lM8  
    %`\Qtsape  
                                                                    
    [-81s!#mkw  
    _34%St!lg  
    }_mMQg2>=  
    发射&损耗激光 -w8?Ur1x:  
    R6:m@  
                                                                            
    ne3t|JZ  
    O*x~a;?G  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 l<ZHS'-;8  
    Fg'{K%t4  
                                                                                     x9 n(3Oa  
    3D STED 轮廓 )]<^*b>  
    Lxv_{~I*  
                   D0MW~Y6{  
                                                        
    =<zlg~i  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 %da-/[  
    Y?zo")  
    受激发射损耗效应                                                                           l8_RA  
    _\= /~>Xl  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 8DbP$Wwi  
    (v:8p!QN  
    :S!!J*0  
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    VirtualLab Fusion 技术                                                                           z(2G"}  
    l|vT[X/g  
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    文件信息 1=!2|D:C)i  
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    进一步阅读 ljz=u;O)  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
    qLKL*m  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy [ :Sl~  
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