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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 z#Cgd-^7.#  
    FNHJHuTe  
     Sd?+j;/"  
                                                                           5X}OUn8  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 omZ bn  
    }Zp5d7(@w  
    任务说明                                                                           V5up/6b,1  
    3IYbgUG  
     2O+fjs  
    "*oN~&flc  
    多重光源                                                                           +]S!pyZ"   
       G_5E#{u  
    EWp'zbWP  
     x-Fl|kwX.5  
    螺旋相位板                                                                           ?t"bF:!  
    N,?D<NjXl  
     MtXd}/  
    Mb\[` 4z  
    探测器插件                                                                           q,fk@GI'2  
    :qxd s>Xm  
     [+ N 5  
    #e5*Dr8  
    参数运行 ghVxcK  
    2\L}Ka|v  
                                                                                 r57rH^Hc  
    TM$Ek^fQ.  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： *h Bo,   
    ]zR,Y= #  
    Usage of the Parameter Run Document #7dM %  
                                                                                     !Z`xwk"!  
    非时序建模 ealh>Y  
    2apQ4)6#[H  
                                                                               oQ_n:<3X  
    *l\vqgv.Z  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 'P,F)*kh  
    T7!=KE_z  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing }hX"A!0  
                                                                                     bmu<V1[W  
    总结 – 组件…           G)wIxm$?0  
    ^p!4`S  
                                                                     >6cENe_@t  
    y1zep\-D  
    ]Zz<9zix  
      {r?qI  
    系统观感 wfc[B;K\  
    #$(wfb9  
                                                                         X>6VucH{\  
    ,wlSNb@'  
    tf@x}  
    发射&损耗激光 NurbioFL  
    $/uNV1 ]o  
                                                                                 -hP-w>  
    ;q&\>u:  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 p; ZEz<M  
    w_ po47S4  
                                                                                     ,*$/2nB^  
    3D STED 轮廓 hT<:)MG)+K  
    _*w}"\4_  
                   D7Nz3.j  
                                                             Pf]O'G&F  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 e`Z3{H}  
    I#tEDeF2  
    受激发射损耗效应                                                                           Ev\kq>2 O  
    L5*,l`lET  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ,As78^E{  
    ]m(5>h#  
    oFeflcSz  
     e[@ ^UY  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ~-w  
    XU#nqvS`.  
     'k9hzk(*  
                                                                                     r,4V SyZF\  
    文件信息 ?JD\pYg[/  
    ;,h*s, i  
    5B<G;if,  
     db!2nImNu\  
    进一步阅读 Q nqU!6k@  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     #dGg !D  
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    Y e}y_W  
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