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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 /tdRUX  
    pYN.tD FO  
     *RYok{w  
                                                                           Dc@OrQu  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 f?JP=j  
    b I"+b\K  
    任务说明                                                                           CH9Psr78  
    &c[ISc>N{  
     k%D|17I  
    E4N/or  
    多重光源                                                                           NI  r"i2  
       g{6FpuA|0  
    l"zwH  
     /6 y9 u}  
    螺旋相位板                                                                           i2P:I A|@  
    u_HCXpP!Q  
     ]A=yj@o$xN  
     L}=DC =E  
    探测器插件                                                                           @#r6->%W  
    S:lie*Aux*  
     &M>o  
    6nA/LW\x  
    参数运行 .QU]  
    #fx>{ vzH  
                                                                                 %ZsdCQc{`  
    Y 'y yrn}  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： ;RK;kdZ  
    i&TWIl8  
    Usage of the Parameter Run Document XvSng"f.  
                                                                                     9^+E$V1@  
    非时序建模 ;#bDz}|\AN  
    XEBeoOX/  
                                                                               'iWDYZ?  
    FLo`EE":O(  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 oTJ^WePZQ  
    w2SN=X~#  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing T' =6_?7K4  
                                                                                     kBU`Q{.  
    总结 – 组件…           p%R+c  
    7NvnCs  
                                                                     0`/CoP<U  
    \`0s %F:V}  
    F'-,Ksn  
     $[g#P^  
    系统观感 y?V^S;}&]  
    'gtcy  
                                                                         m[CyvcF*u  
    r=HL!XFk  
    cd|/ 4L 6  
    发射&损耗激光 pAws{3(Q  
    G0A\"2U  
                                                                                 Wn{MY=5Y  
    i A<'i8$P  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 q/^?rd  
    Bg[_MDWc-P  
                                                                                     F/PH=Dk  
    3D STED 轮廓 9;Q|" T  
    Eunmc  
                   ;X;(7  
                                                             OZ33w-X<  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 U[?f@.&  
    kl1/(  
    受激发射损耗效应                                                                           l"1*0jgBw  
    i &%m^p  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ,D'm#Fti  
    R$p(5>#\5  
    /'/i?9:  
     )HcLpoEi  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           on;>iKta9  
    $<9u:.9xf  
     - ~4na{6x  
                                                                                     O^PN{u  
    文件信息 )FSEHQ  
    /ykc`E?f  
    n.i 8?:  
     m[z $y  
    进一步阅读 +v~x_E5FP  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     qyAnq%B}  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy a`8]TD  
    sjOv!|]A  
    市场图片 G3 |x%/Fbp  
    UM`{V5NG#  
     O c.fvP^ZD  
     
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