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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 2/Ye<.#  
    E^m)&.+'M  
     ]\]mwvLT  
                                                                           t{`-G*^  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 8#4Gs Q"  
    Q5u3~Q'e  
    任务说明                                                                            v&7x ~!O  
    XpA|<s  
     8ZJ6~~h  
    `6LV XDR  
    多重光源                                                                           W)Y:2P<.  
       )bpdj,  
    ,mKUCG  
     %o`Cp64`Q  
    螺旋相位板                                                                           *OHjw;xm+  
    =#wE*6T9  
     v+dT7* ^@  
    ]iZ-MG)J  
    探测器插件                                                                           =/4}!B/  
    p%/lP{  
     PWfd<Yf!  
    |HPb$#i  
    参数运行 ZS@R?  
    vkW;qt}yO  
                                                                                 `_"?$ v2F  
    ^ ,[gO#hgz  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： @[n%q.|VB  
    |>-0q~  
    Usage of the Parameter Run Document 6+C]rEY/o  
                                                                                     cCIs~*D  
    非时序建模 3ZvQUH/{W  
    g%D.sc)69  
                                                                               "c![s%  
    JqEo~]E]  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 rKl  
    Hq,N OP  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 'o7V6KG  
                                                                                     NIC.c3  
    总结 – 组件…           wB<cW>6  
    P_gai7Xg  
                                                                     1W9uWkk_d  
    Yof ]  
    P{,=a]x,mz  
     ntZHO}'  
    系统观感 gpCWXz')i  
    `|:` yl  
                                                                         8{Vt8>4  
    p#gf^Y5  
    yWi?2   
    发射&损耗激光 AQc9@3T~Bi  
    jLEO-<)-)  
                                                                                 )=0@4   
    qf%p#+:B3  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 WTZuf9:  
    i^rHZmT  
                                                                                     1\5po^Oioy  
    3D STED 轮廓 p >nKNd_aQ  
    0rc'SEl  
                   "h&[6-0'  
                                                             X C '|  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 @~IZ%lEQsD  
    jYW-}2L  
    受激发射损耗效应                                                                           Gk|T1%  
    Qr~yHFc1y  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 |(9l_e|  
    SqoO"(1x  
    "}uV=y  
     o7yvXrpG(U  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           w X.]O!^X~  
    @EH@_EwYV  
     _,*QJ  
                                                                                     Oq 95zo  
    文件信息 a!;K+wL >  
    >< Qp%yT  
    *,wW-8  
     '8|joj>G=  
    进一步阅读 ~8[`(/hj  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     oCB#i~|>a  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy .3xf!E*  
    [ _&z+  
    市场图片 Ia>~ph#]{`  
    4& 9V  
     |PLWF[+t8  
     
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