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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 KZjh<sjX|  
    bvtpqI QZ  
     '|4+< #  
                                                                           ^;_~ mq.  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 8NHm#Z3Ol  
    M,fL(b;2  
    任务说明                                                                           rk8pL[|  
    Zkd{EMW  
     F_*']:p  
    [@Ac#  
    多重光源                                                                           lndz  
       CI{2(.n4  
    AfA"QCyO  
     dQ8RrD=$&  
    螺旋相位板                                                                           <(KCiM=E$  
    5 e+j51  
     zz*PAYl.  
    AU\=n,K7  
    探测器插件                                                                           0 SSdp<  
    <;Hb7p3N  
     7z$Z=cs  
    eS!]..%y  
    参数运行 6nk }k]Ji  
    fi HE`]0  
                                                                                 ,4H? +|!  
    ,LA'^I?  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 'u<e<hU  
    iI<c  
    Usage of the Parameter Run Document 6RbDc *  
                                                                                     w80X~  
    非时序建模 LWM<[8wJ4  
    /f[Ek5/-0  
                                                                               mEJ7e#  
    XKTDBaON  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 qO"QSSbZqQ  
    z}Cjk6z@  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing s^zlBvr|.  
                                                                                     Gt&yz"?D  
    总结 – 组件…           %!\=$s}g  
    *W8n8qG%T  
                                                                     ^# $IoW  
    pX_  
    4;L|Ua  
     4C`RxQJM  
    系统观感 >2s6Y  
    - jZAvb  
                                                                         7"Xy8]i{z  
    L~5f*LE$1  
    |X=p`iz1&  
    发射&损耗激光 {>hxmn  
    9^!.!%6O$  
                                                                                 9CS" s_  
    0Ye/  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 QT+kCN  
    qA '^b~  
                                                                                     (n kg  
    3D STED 轮廓 ~S('\h)1  
    0cG[<\qT  
                   T)e2IXGN  
                                                             <ci(5M  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 X.#*+k3s0  
    zCJ"O9G<V  
    受激发射损耗效应                                                                           JAHg_!  
    sN1H{W  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 2@MpWj4  
    Y A,. C4=s  
    yr},pB  
     ^!B]V>L-  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           3YLK?X8  
    h1q 3}-  
     f1:>H.m`  
                                                                                     h.?<( I  
    文件信息 Zw)=Y.y!  
    cy@oAoBq  
    fa]8v6  
     yreH/$Ou 8  
    进一步阅读 (^~a1@f,J  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     pbG-uH^  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy f=91 Z_M  
    F7<M{h5s  
    市场图片 5:38}p9`  
    s[7$%|~W  
     jk`U7 G*  
     
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