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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 { 4(E @  
    _Coh11  
    @H?_x/qBT  
                                                                      
    +/L "A  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 jw^Pt~@  
    ^JKV~+ Q  
    任务说明                                                                           xq.HR_\  
    ~|7jz;$V  
    -X)KY_Xn@/  
    ?\eq!bu  
    多重光源                                                                           `k>h2(@9S  
       <`~zKFUQ[  
    ;g0p`wV  
    0%9Nf!j  
    螺旋相位板                                                                           Bx>)i8P7i0  
    x9c/;Q &m  
    X)tf3M {J@  
    JpFfO<uO  
    探测器插件                                                                           w# t[sI"IT  
    (($"XOU  
    J:{$\m'  
    Mk*&CNo3  
    参数运行 m _0D^e7#  
    -\.'WZo`  
                                                                            
    nmLn]U=  
    s?.A $^t  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: sw(dd01a 7  
    2(, `9  
    Usage of the Parameter Run Document qrFC4\q}  
                                                                                     ?Q~6\xA  
    非时序建模 R"au8f.  
    ON(H7  
                                                                          
    6Q&*V7EO  
    d" "GG/  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 s[V$f vW  
    4)o_gm~6c4  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing z)Y<@2V*C  
                                                                                     Pgy&/-u  
    总结 – 组件…           \~(ww3e  
    sGf\!w  
                                                                
    v}=3  
    }HM8VAH  
    T:$zNX<f  
    blwdcdh  
    系统观感 _.xT :b36  
    I[~EQ {Iz  
                                                                    
    iK*2 Z$`lw  
    RP 2MtP"M  
    ?G5JAG`  
    发射&损耗激光 "d a%@Zy  
    [TZlvX(E  
                                                                            
    ;CU<\  
    _)J;PbK~  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 $J/Z~ (=JT  
    wff&ci28  
                                                                                     &CvNNDgrJ  
    3D STED 轮廓 00') Ol&  
    Lp; {&=PIo  
                   _E e`Uk  
                                                        
    Y",Fs(  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 uzO%+B!  
    Y$%/H"1bk  
    受激发射损耗效应                                                                           +$MNG   
    ZQT14.$L  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 xw*T? !r=V  
    g)*[W>M  
    pV#~$e  
    ckqU2ETpD}  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ,x| 4nk_  
    DWB.dP *8  
    ~q]+\qty4  
                                                                                     7qB}Hvh  
    文件信息 i|X ;n  
    %]JSDb=C  
    0`=#1u8  
    N[ %^0T$  
    进一步阅读 fF208A7U I  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
    NymS8hxR  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy [>P@3t(/  
    `A@{})+  
    市场图片 nXDU8|"  
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