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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 7小时前
    摘要 tU{\ev$x  
    Pubv$u2  
     #ra*f~G  
                                                                           9mDn KW  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 `^x9(i/NE  
    Ps3~{zH`  
    任务说明                                                                           ytiyF2Kp  
    eQ;Q4  
     /D'M24  
    ;g+]klR!  
    多重光源                                                                           W&YU^&`Yr  
       FIS "Z(  
    DHv2&zH  
     b1xpz1  
    螺旋相位板                                                                           q*bt4,D&Es  
    -%,"iaO  
     BZ+;n |<r  
    ,:UX<6l R  
    探测器插件                                                                           FAw1o  
    {~_ Y _-  
     'OD) v  
    /OG zt  
    参数运行 gfN2/TDC]P  
    t"|DWC*  
                                                                                 H O*YBL  
    F?BS717qS%  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： _~&9*D$ {>  
    UFw](%=&M  
    Usage of the Parameter Run Document :IZ"D40m"  
                                                                                      R%"K  
    非时序建模 D"^'.DL@wG  
    |55dbL$w  
                                                                               oL-2qtv  
    {$33B'wk  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Q|c|2byb  
     to>  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 4-^[%&>}  
                                                                                     "VTF}#Uo  
    总结 – 组件…           2+Yb 7 uI,  
    |##GIIv;i  
                                                                     cU8xUpq  
    )/>A6A:  
    ^2C>L}  
     S-c ^eLzQ  
    系统观感 g`[$Xi R  
    J# EP%  
                                                                         IZrk1fh  
    v0LGdX)/Y  
    Wekqn!h  
    发射&损耗激光 i=#F)AD^5#  
    J'Sm0  
                                                                                 3i=Iu0  
    v* ~3Z1  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 fzPZ|  
    izuF !9  
                                                                                     >2lwWXA  
    3D STED 轮廓 L'E^c,-x~  
    f<=Fe:1.  
                   U>Gg0`>  
                                                             .zkP~xQ~  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 <[i}n55  
    G5Ykbw#  
    受激发射损耗效应                                                                           6gU{(H   
    c^9tYNn  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 r,NgG!zq<  
    fk{0d  
    J ^ G  
     *y]+dK&-  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           @dEiVF`4:  
    H"Dn]$Q\Z  
     OZ(dpV9.S  
                                                                                     %!|O.xxRR  
    文件信息 +ts0^;QO2{  
    <+tD z(  
    s\3q!A?S3  
     m;,xmEp  
    进一步阅读 \#Up|u:  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     qTmD '2  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy y7lWeBnC  
    )jDJMi_[  
    市场图片 c0rk<V%5+  
    go'j/4Tp  
     0XU}B\'<  
     
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