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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 3z{?_;bR  
    ux vqMgR  
     iJ1"at  
                                                                           Z`ID+  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 z[L8$7L  
    ,St#Vla  
    任务说明                                                                           @tNzQ8  
    "n(hfz0y%  
     #S!)JM|4wk  
    hKL4cpK4  
    多重光源                                                                           P}n_IV*@  
       1 ySk;;3  
    Hq:X{)"  
     I9_RlAd  
    螺旋相位板                                                                           s >7}zU]  
    Y']\Jq{OS  
     h-q3U%R4}@  
    v_+{'F  
    探测器插件                                                                           }YGV\Nu  
    ! >(7+B3E*  
     jnO9j_CY  
    O_oPh] x)  
    参数运行 bnf'4PAt  
    i [7\[  
                                                                                 `2("gUCm  
    naG=Pq<  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： o=1Uh,S3R  
    5Dm.K?l;  
    Usage of the Parameter Run Document kCWV r  
                                                                                     +%yfcyZ.  
    非时序建模 ^a0um/+M}  
    g:g\>@Umo  
                                                                               h \fjBDU^  
    +~m46eI  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 HVR /7&g  
    Aza /6OL  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing x9UX!Z5*>  
                                                                                     X`kk]8 =  
    总结 – 组件…           'f!8DGix  
    JU1~e@/'%  
                                                                     [+2[`K c]  
    ##,a0s^  
    Ra)3+M!x  
     HJ=:8:  
    系统观感 k9sh @ENy  
    \=VtHu92=  
                                                                         '\l"   
    >*~L28Fyn  
    SD"FErJ  
    发射&损耗激光 ?8npG]L)  
    dI.WK@W'o  
                                                                                 l+xX/A)  
    Si2k"<5 U  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 kj#?whK6~  
    k^3>Y%^1  
                                                                                     [_R~%Yh+'E  
    3D STED 轮廓 [L3=x;U  
    p|X"@kuseO  
                   x[FJgI'r  
                                                             zqimR#u  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 k3lS8d7  
    \pa"%c)  
    受激发射损耗效应                                                                           K[I=6  
    27eooY1  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 py$Q  
    -^&<Z 0m  
    {fPy=,>Nb  
     'F+C4QAq  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           epA:v|S  
    so,t   
     0IsPIi"7  
                                                                                     %f&/E"M  
    文件信息 RD!&LFz/}  
    U$O\f18  
    m~iXl,r  
     R5N%e%[  
    进一步阅读 H*d9l2,KZS  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     jZu[n)u'C  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy hE-h`'ha`  
    %|s; C  
    市场图片 C8J[Up  
    rMdt:`  
     >nJ\BPx  
     
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