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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    光币
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    光券
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 AFE~ v\Gz  
    NyNXP_8  
     8&b,qQ~  
                                                                           tf`^v6m%]  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ^SrJu:Q_  
    !%%6dB@%t  
    任务说明                                                                           IF:;`r@%  
    %6f*{G w  
     J<jy2@"tXo  
    $*=<Yw4  
    多重光源                                                                           Yr[\|$H5  
       oe-\ozJ0  
    amY!qg0P*  
     w NdisI  
    螺旋相位板                                                                           T1=fNF  
    s?L  
     II{&{S'HU  
    _KAQ}G3  
    探测器插件                                                                           pIqeXY  
    I51@QJX  
     C!bUI8x z  
    E$p+}sP(C  
    参数运行 ]N F[>uiW  
    k\?Ii<m  
                                                                                 o0KL5].  
    |aq"#Ml)  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： JT_ `.(  
    `3&v6  
    Usage of the Parameter Run Document =Jb>x#Y  
                                                                                     6qnzBA7  
    非时序建模 Z/+#pWBI!  
    tK\~A,=  
                                                                               JZyAXm%  
    A2Gevj?F$  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 [`7ThHX  
    3)ywX&4"L  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing {3aua:q  
                                                                                     YNi.SXH  
    总结 – 组件…           & >fQp(f  
    $6SW;d+>n  
                                                                     dvUic-w<j  
    0n{=%Q  
    P/_['7  
     *J`O"a  
    系统观感 / %io+94  
    TOQP'/   
                                                                         {bY%# m  
    i=2N;sAl  
    FU4L6n  
    发射&损耗激光 nAdf=D'P  
    b d!Y\OD  
                                                                                 d/~9&wLSb  
    DSn_0D  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 hp|YE'uYT  
    L.JT[zOfb  
                                                                                     *\F~[  
    3D STED 轮廓 IW] rb/H  
    3/eca  
                   R0*|Lo$6  
                                                             6.yu-xm  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ;9QEK]@  
    }Jj}%XxKs  
    受激发射损耗效应                                                                           @f3E`8  
    ; BHtCuY  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 KoT%Mfu  
     rjnrju+  
    wN~_v-~*Q  
     5\VWCI  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           DZtsy!xA  
    A|{(/G2*  
     sK?twg;D*|  
                                                                                     q'Pf]  
    文件信息 bW(0Ng  
    j^RmrOg ,  
    [j+sC*  
     PLBr P  
    进一步阅读 a/xn'"eli  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     M kXmA`cP  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy c'\dFb9a  
    SNk=b6`9  
    市场图片 Z6MO^_m2  
    *MW\^PR?  
     'i|YlMFIg  
     
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