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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 /rquI y^  
    O)hNHIF  
     "Aynt_a.  
                                                                           #e=[W))  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ZqSczS7uf  
    >BiJ/[9  
    任务说明                                                                           P:Bg()  
    f>Ge Em~  
     ?O28Q DUI  
    +Ix;~  
    多重光源                                                                           Tfj%Sb,zM  
       d hh`o\$  
    qLcs)&}/A  
     [z/OY&kF  
    螺旋相位板                                                                           &Y\`FY\   
    -&+[/  
     ?8`b  
    Nkc=@l {  
    探测器插件                                                                           u-8,9  
    Z5v\[i@H!  
     sVGyHA  
    ]@_*O$  
    参数运行 DRal{?CH  
    ]c*&5c$  
                                                                                 -2f_e3jF  
    KZ&{Ya  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： -_B*~M/vV`  
    oB+drDp8U  
    Usage of the Parameter Run Document PKmr5FB  
                                                                                     K1jE_]@Z  
    非时序建模 BjSLbw-C  
    Uh{|@D  
                                                                               kid@*.I  
    \:8 >@Q  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 L)kwMk  
    H|5\c=  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing d7A vx  
                                                                                      2>p>AvcK  
    总结 – 组件…           ZPRkk?M}.  
    %R."  
                                                                     Z!DGCw  
    EP,lT.u3  
    Db@$'  
     |BN^5m qP6  
    系统观感 eX>x +]l6  
    eqV;4dhm  
                                                                         ]U82A**n  
    C`Zz\DNG@  
    8!sl) R  
    发射&损耗激光 }Dp/K4  
    CKCot  
                                                                                 jhg0H2C8  
    /GRkQ",  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 lG6P+ Z/nf  
    ?`8jn$W^  
                                                                                     VBo=*gn,$  
    3D STED 轮廓 q-}q rg  
    B^nE^"b  
                   d#NG]V/   
                                                             GUSEbIz):  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 V^apDV\AV  
    DxoW,G W  
    受激发射损耗效应                                                                           54r/s#|-3  
    $bOiP  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 j`7q7}  
    OO#_ 0qK  
    '*lVVeSiFw  
     ^ZuwUuuf  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           "n'kv!?\  
    }LeizbU  
     lub_2Cb|j  
                                                                                     m) QV2n  
    文件信息 ~HBQQt  
    ZD~ra7  
    07b =Zhh  
     FLUvFD  
    进一步阅读 (X zy~l<  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     RqB 8g  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy zo83>bt  
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