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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    光券
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 Zjn1,\(t~u  
    xe6V7Wi/Tt  
     4J`-&05O  
                                                                           Ux?G:LLz  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 2\.23  
    c8]%,26.  
    任务说明                                                                           g,*fpk  
    ^y ', l  
     ! 1?u0  
    >Giw\|:f(  
    多重光源                                                                           R~A))4<%%  
       X`&Us  
    HQ=pf >  
     `_/1zL[  
    螺旋相位板                                                                           )40YA\V  
    N1g;e?T ':  
     \Qv:7;?  
     WSeiW  
    探测器插件                                                                           @ >'Wiq!  
    :T6zT3(")D  
     8Rw:SU9H?T  
    S+6YD0  
    参数运行 X_JC1  
    c uAp,!  
                                                                                 d_:tiHw$  
    .ozBa778u  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： =$~x]  
    V^D 1:9i  
    Usage of the Parameter Run Document R(y`dQy<K  
                                                                                     *2pE39  
    非时序建模 "/^kFsvp  
    4u|6^ wu.I  
                                                                               *x#5S.i1  
    )i39'0a  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 e6jdSn  
    )('{q}JxV  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 3!*` hQ;s  
                                                                                     }EfRYE$E  
    总结 – 组件…           S)2Uoj  
    [A!=Hv_$  
                                                                     _fj@40i M  
    *"/BD=INv}  
    |QH )A  
     `i!-@WN"  
    系统观感 J{EK}'  
    \FO 4A  
                                                                         hoPh#? G  
    kmfz.:j{  
    L<<v   
    发射&损耗激光 eBECY(QMQ  
    K}S=f\Q]  
                                                                                 TSL/zTLDJ  
    \=W t{  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 5oD%~Fk l  
    ,qgR+]?({  
                                                                                     Tc;BE  
    3D STED 轮廓 h2]G V-  
    E&W4`{6K4  
                   cz>`$Zz  
                                                             !G ~\9  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Me,AE^pgL'  
    #0qMYe>Y  
    受激发射损耗效应                                                                           U@:iN..  
    !.{{QwZ  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 fV/  
    s.}:!fBk  
    ~Oj-W6-+&,  
     *UG=dl#F#  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           f7]C1!]  
    ;}4e+`fF|  
     +7)/SQM5  
                                                                                     GZFLJu  
    文件信息 f9E.X\"  
    Lr(wS {  
    F>3fP  
     dG]s_lb9H  
    进一步阅读 hRN>]e,!  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     ;V~~lcD&Y`  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy iuq%Q\0@w  
    7\;gd4Ua1  
    市场图片 VrRBwvp-K  
    k{$Mlt?&-  
     Riz!HtyR  
     
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