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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 12小时前
    摘要 ZxY%x/K  
    *IfLoKS'  
     [/\}:#MLe  
                                                                           5Q =o.wf  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 p v%`aQ]o{  
    \K55|3~R  
    任务说明                                                                           K '7M\:zy  
    0"LJ{:plz  
     Dy mf  
    \\xoOA.  
    多重光源                                                                           g=Rl4F]  
       v:|_!+g:  
    9n%vz@X  
     *7FtEk/l  
    螺旋相位板                                                                           M:rE^El  
    %xPJJ $P  
     67?O}~jbG  
    6C7|e00v  
    探测器插件                                                                           `B-jwVrN(  
    A63=$  
     2Jm#3zFYz3  
    }}G`yfs}r  
    参数运行 RR |Z,  
    0QcC5y;  
                                                                                 i_Ol vuy~  
    "V'<dn  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： |ZC@l^a7  
    epXvk &  
    Usage of the Parameter Run Document Cj'X L}  
                                                                                     &P'd&B1   
    非时序建模 {_C2c{  
    9(eTCe-~6  
                                                                               )&Af[m S  
    yzWVUqtXm  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 QN)EPS:y  
    /3#)  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing +7E&IK  
                                                                                     [`(W(0U%  
    总结 – 组件…           t[}&*2"$/  
    \ ]v>#VXr_  
                                                                     '8Wu9 phT  
    s`#g<_{X  
    Z@(m.&ZRx  
     q[}W&t,  
    系统观感 {?X:?M_  
    vX30Ijm  
                                                                         n~_;tO  
    wDp5HZ>  
    ?hBjq  
    发射&损耗激光 &+|bAn9AJ  
    L+ K,Y:D!W  
                                                                                 ;r?s7b/>  
    "* 8>` 6E  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 >v#6SDg  
    9KCeKT>v  
                                                                                     MMU>55+-  
    3D STED 轮廓 6v?tZ&, G  
    :6TLT-B  
                   !:2_y'hA  
                                                             `}.jH1Fx/m  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 #kQ1,P6,(  
    U2G[uDa;  
    受激发射损耗效应                                                                           .C|dGE?,  
    T deHs{|  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 WU\Bs2  
    l3N '@GO  
    \%}w7J;  
     Lo*vt42{4  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           \ORE;pG  
    q~. .Z Y`7  
     4D)M_O  
                                                                                     p}]K0F!  
    文件信息 `D $ "K1u  
    }Jo}K) >!  
    "N3!!3  
     E3V_qT8  
    进一步阅读 !ZS5}/ZU  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     s:xt4<  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy Owz>g4l r  
    Z6fR2A~Q[  
    市场图片 8}aSSL]  
    M~U>" kX  
     4Q(w D  
     
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