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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 #~^Y2-C#  
    38T2IN  
     E6d0YgfD  
                                                                           <ib# PLRM  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Yj^n4G(h  
    cC6W1K!  
    任务说明                                                                           !&D&Gs  
    <<P& MObqj  
     YS5Pt)?  
    e'uI~%$NJL  
    多重光源                                                                           P=V=\T<4_  
       %maLo RJ  
    jz2W/EE`w  
     wDV%.Cc  
    螺旋相位板                                                                           S:GX!6>  
    PuhFbgxy  
     Td5;bg6Qy  
    &dkjT8L$  
    探测器插件                                                                           QviH+9  
    fN TPW]  
     Svo gvn  
    {uRnZ/m  
    参数运行 JYB<};,  
    ` AA[k  
                                                                                 J!o[/`4ib  
    V[Jd1T  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： l1\/ `  
    6* /o  
    Usage of the Parameter Run Document DM%4 V|F"  
                                                                                     6XO%l0dC.  
    非时序建模 r~uWr'}a}  
    Q2)z1'Wv  
                                                                               3cNF^?\=  
    ttPa[h{!  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 F.b;O :  
    6t|FuTC  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing x62 b=k}  
                                                                                     Z4/rqU  
    总结 – 组件…           6U k[_)1  
    !'No5  
                                                                     ~bCn%r2  
    Y zXL8  
    37wm[ Z  
     A|V |vT7cb  
    系统观感 D84`#Xbi  
    H/p<lp  
                                                                         $Blo`'  
    \w!G  
    `}KK@(Y  
    发射&损耗激光 SB1\SNB  
    z6 v RTY  
                                                                                 iO;q]  
    XX5 ):1  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 'Lft\.C  
    AfG!(AF`  
                                                                                     Lnnl++8Y  
    3D STED 轮廓 1o7 pMp=  
    t+k"$zR  
                   +.Kmpw4  
                                                             ^IuHc_  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 \. A~>=:  
    2+Z2`k]AC  
    受激发射损耗效应                                                                           ?w1_.m|8u  
    &3mseU  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 :<w3.(Z  
    /_?E0 r  
    x"~F=jT  
     LMWcF'l  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           SI3ek9|XU  
    lztPexyXZ  
     _cx}e!BK#  
                                                                                     Xi_>hL+R(  
    文件信息 wHk4BWg-  
    F8?&Ql/hdz  
    Re('7m h~  
     VkT8l4($X<  
    进一步阅读 !m rB+<:  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     3uCC_Am  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy Z mF}pa,gd  
     ;uNcrv0J  
    市场图片 eMVfv=&L<3  
    L@w|2  
     u4NMJnX  
     
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