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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 C\1x3  
    .J2tm2]"EZ  
     Y:]m~-T  
                                                                           z_t%n<OvK  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Z!oq2,ia  
    c+G%o8  
    任务说明                                                                           $Rf)iW;h  
    E:$r" oS  
     l1" *  
    b|u0a6  
    多重光源                                                                           'a=QCO 0  
       ::p(ViYG  
    &h;J_Ps  
     ^wb$wtL('  
    螺旋相位板                                                                           je5GZFQw  
    &z;1Z  
     U3M;6j9`  
    I{uwT5QT-  
    探测器插件                                                                           5>S)+p  
    Cg];UB}k  
     ,qK3 3Bn  
    =g$>]AE  
    参数运行 t@3y9U$  
    :lp V  
                                                                                 l]Q<BV  
    2D ' $  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： &Q[|FO;[  
    :Wd@Qy?;  
    Usage of the Parameter Run Document 75*q^ui  
                                                                                     "\l#q$1h  
    非时序建模 yFjjpEpnFt  
    V-w{~  
                                                                               |)b:@q3k+n  
    m 9.BU2.  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 s=83a{#K  
    uu;1B.[b  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing :a'[ 4w  
                                                                                     =~ [RG  
    总结 – 组件…           _?c7{  
    dNT<![X\  
                                                                     i 3i  
    raB', Vp  
    l1ViUY&Z  
     V D.T=(  
    系统观感 N7mYE  
    M|}V6F_y  
                                                                         GVUZn//  
    /=S\v<z  
    $Lt'xW`8  
    发射&损耗激光 3D2i32Y@!  
    P|QM0GI  
                                                                                 aP/Ff%5T  
    tu5T^"B qO  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 `tEW.s%Y(6  
    ){$*<#&H  
                                                                                     gfly?)VnF  
    3D STED 轮廓 V[ 'lB.&t  
    s|9[=JMG  
                   F6gU9=F1<  
                                                             ]jgMN7  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 nr- 32u  
    W*^_Ul|  
    受激发射损耗效应                                                                           e^yfoE<7  
    ^!*nhs%  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 x<\5Jrqt  
    [K""6D  
    >Q[3t79^  
     7&3  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           bO+]1nZ.  
    6 }>CPi#  
     6\vaR#  
                                                                                     L-1#n  
    文件信息 A&D<}y/%  
    W}'l8z]   
    G|.6%-  
     =+w!fy  
    进一步阅读 $nr=4'y Z  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     {iYrC m[_  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy r2T$ ;m.  
    =hi{J M  
    市场图片 ,ut7`_Fy  
    )LTX.Kg  
     K8RV=3MBLD  
     
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