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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 x%m%_2%Z  
    /QWvW=F2<  
     !8d{q)JZ  
                                                                           c /HHy,  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Gbr=+AT  
    @Z %ivR:  
    任务说明                                                                           mbxZL<ua  
    \BTODZ:h  
     NZLxHD]mp  
    ox~o J|@  
    多重光源                                                                           m)t;9J5  
       :Zbg9`d*  
    )._;~z!  
     KNvZm;Q6  
    螺旋相位板                                                                           Uw. `7b>B  
    O7m(o:t x3  
     <4si/=  
    }<v@01  
    探测器插件                                                                           ?%-DfCS  
    %COX7gV  
     @s;;O\  
    HZC"nb}r4  
    参数运行 {yHCXFWlS  
    QvlObEhcS  
                                                                                 5oW!YJg  
    qFCOUl  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： B$fPgW-  
    ?}tFN_X"  
    Usage of the Parameter Run Document (ylTp]~mR-  
                                                                                     @sW24J1q+  
    非时序建模 9k '7832u  
    &tLgG4pd  
                                                                               (&F}/s gbi  
    mI-]/:  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 f P 1[[3i  
    A5I)^B<(  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ;>EM[u  
                                                                                     KK/tu+"  
    总结 – 组件…           S"bg9o  
    X8a/ `Y,  
                                                                     BQE|8g'&T  
    r[`9uVT/  
    VK\X&Y3l  
     +K:Dx!9  
    系统观感 N]Y d9tn{  
    P6'1.R  
                                                                         Z*]9E^  
    O~#!l"0 L+  
    }I+E\ <  
    发射&损耗激光 ,i?nWlh+  
    mW(W\'~_~  
                                                                                 |PCm01NU!  
     9X+V4xux  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 `_Zg3_K.dS  
    36&e.3/#  
                                                                                     B:yGS*.tu  
    3D STED 轮廓 hB]Np1('  
    .GP T!lDc  
                   O'p9u@kc  
                                                             ios&n)W&  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 KI iO  
    a8e6H30Sm  
    受激发射损耗效应                                                                           ed{ -/l~j  
     c(f  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ~]|6T~+]83  
    4<w.8rR:A  
    Af~$TyX  
     av8B-GQI*#  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           )5Q~I,dP  
    9IdA%RM~mH  
     CAig ]=2'  
                                                                                     Wa>}wA=v  
    文件信息 d=$Mim  
    ^qvZXb  
    T[w]o}>cW  
     XB;7!8|  
    进一步阅读 ~f&E7su-6+  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     w_"E*9  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy :(U ,x<>  
    hE'-is@7  
    市场图片 gS!:+G%  
    x$A+lj]x  
     P-9)38`5  
     
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