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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 正序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 2;"vF9WMm  
    0]*W0#{Zj  
     0n6eWwY  
                                                                           Q njK<}M9  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 [Z2[Iy  
    ~A5NseWCK  
    任务说明                                                                           KzV|::S^  
    K JOb1MM  
     @d~]3T  
    :3R3 >o6m  
    多重光源                                                                           qGV(p}$O  
       `3ha~+Goo!  
    zF^H*H  
     dl8f]y#Q  
    螺旋相位板                                                                           BNjMq  
    YHom9& A  
     p<'pqf  
    7K.],eo0  
    探测器插件                                                                           7J5jf231  
    (n.IK/:  
     G)[gLD{g?  
    o:ow"cOEf  
    参数运行 F7jkl4  
    D :j5/ *  
                                                                                 V6d,}Z+"z'  
    /~WBqcl  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： PPV T2;9  
    PR!0=E*}  
    Usage of the Parameter Run Document ^ op0" #B  
                                                                                     Q%q;=a  
    非时序建模 )K]p^lO  
    q1L>nvE  
                                                                               k)D5>T  
    V*O[8s%5v  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 .YvIVQ  
    I>l^lv&[+  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ~"\v(\Pe  
                                                                                     @|"K"j#  
    总结 – 组件…           r ^*D8  
     U&  
                                                                     vs+aUT C\  
    9pj6`5Zn@6  
    fW=<bf  
     ?o6#i3k#'  
    系统观感 Q6URaw#Yt`  
    GY@:[u.&  
                                                                         Y=Ic<WHR  
    A:y^9+Da  
    Oh10X.)i  
    发射&损耗激光 }BT0dKx  
    /CyFe<t  
                                                                                 GSSmlJ`  
    wBw(T1VN  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 C7W<7DBf  
    ?5B?P:=kl  
                                                                                     tUOY`]0  
    3D STED 轮廓 K% snE7X?)  
    Mr4,?Z&`-d  
                   sqV~ Dw  
                                                             60ciI,_`  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 h:G>w`X  
    xj8z*fC;  
    受激发射损耗效应                                                                           hW!n"qU  
    4bw4!z9G  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 pJ1\@G  
    p{ZyC  
    ,UVu.RjXN  
     %LmsywPPp  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           %#&njP  
    -(lP8Y~gFY  
     ]o=ON95ja  
                                                                                     %;u"2L0@  
    文件信息 ] `q]n  
    {' 0#<Z  
    )/Eu=+d  
     rx9y^E5T`;  
    进一步阅读 {SXSQ'=  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     S#yGqN0i  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy v#s*I/kw  
    [7 r^fD A  
    市场图片 o-l-Z|)7  
    S!gzmkGcj  
     [S~Bt78d%r  
     
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