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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 |~mq+:44+  
    S0.   
     Id8^6FLw  
                                                                           Hbogi1!al|  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 3md yY\+&  
    x Lht6%o*  
    任务说明                                                                           oQJK}9QR  
    j^A0[:2  
     e6s-;  
    1g`$[wp|  
    多重光源                                                                           YpQ/ )fSEV  
       2!QS&i  
    :b+C<Bp64r  
     #5HJW[9  
    螺旋相位板                                                                           $I(2}u?1+d  
    9:0JWW^so  
     <qH>[ \  
    Qxj &IX  
    探测器插件                                                                           EgIFi{q=0  
    -L7Q,"a$  
     fd >t9.  
    @D K,ka(  
    参数运行 >O[# 661  
    :w_J/k5Zd  
                                                                                 =!3G,qV  
    e#`wshtN:  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： GRz`fO  
    N>;"r]Rl"  
    Usage of the Parameter Run Document nIVPh99  
                                                                                     #p~tkQ:'1  
    非时序建模 W&`_cGoP  
    l= 5kd.{  
                                                                               ?}^e,.M0?s  
    ]dk44,EL  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 =g' 7 xA  
    V/i&8UMw  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing s$xctIbm?,  
                                                                                     $oK,&_  
    总结 – 组件…           }8 A]  
    7 ]a6dMh  
                                                                     ==I:>+_ ^|  
    o2?[*pa  
    @V)k*h3r+  
     V ea>T^  
    系统观感 hBDPz1<  
    jeMh  
                                                                         (A`/3Aq+  
    8^j u=  
    Fc>W]1  
    发射&损耗激光 y|V/xm+Fp  
    4VLrl8$K  
                                                                                 R^P~iAO  
    <jU[&~p  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 m *8[I  
    ,eD@)K_:  
                                                                                     7~TE=t  
    3D STED 轮廓 Q(gu ";&  
    yNdtq\h  
                   pgT{#[=>  
                                                             q{Hk27kt  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 "XMTj <D  
    X4*{CM  
    受激发射损耗效应                                                                           P:t|'t  
    ":?>6'*1  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ohusL9D  
    x-) D@dw<  
    A- IpE  
     Y TxUKE:  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           -wlob`3  
    HH+NNSRO  
     34U/"+|z  
                                                                                     ^#e:q  
    文件信息 K) $.0S9d  
    7qA);N  
    ya{vR* '~  
     zAt!jP0E  
    进一步阅读 cqr!*  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     ^*'|(Cv  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 9I=J#Hi|+  
    h J#U;GL  
    市场图片 Sj(uc#  
    )ruC_)  
     G+AD &EHV  
     
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