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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 oo2d,  
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     bI|G %  
                                                                           e }?.3,?  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 $7DW-TA  
    {~&Q"8 }G  
    任务说明                                                                           ;]Q6K9.d8  
    ll4CF}k  
     2<I=xWwFA  
    Rh|9F yN  
    多重光源                                                                           j\~,Gtn>Z  
       C&H'?0Y@  
    0LH6G[  
     .cQO?UKK  
    螺旋相位板                                                                           e~zgH\`  
    aF^N  Ye  
     b;UDgq8v  
    oH%[8!#  
    探测器插件                                                                           ,GYQ,9:  
    6d6cZGS[:  
     oC>J{z  
    [M~tH *4"  
    参数运行 rN} 8~j  
    3PU_STSix  
                                                                                 EwN{|34C  
    &=kv69v  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 196a~xNV  
    pvyEs|f=%  
    Usage of the Parameter Run Document e6j1Fa9  
                                                                                     `/>kN%  
    非时序建模 %T]^,y$n  
    t!qLgJ5%y  
                                                                               Mi8)r_l%O  
    R#4l"  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 rV%T+!n%c  
    )xV37]  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing <N=k&\  
                                                                                     Fk/I (Q  
    总结 – 组件…           w!20  
    kx;X:I(5&P  
                                                                     1 6zxPSTr}  
    M<w.q|P  
    +zMPkbP6  
     |z=`Ur@)  
    系统观感 J#Hh4Kc  
    JfN5#+_i  
                                                                         CXuD%H]tx  
    [G|.  
    uxU-N  
    发射&损耗激光 [_)`G*X(N  
    hD ~/ywS&  
                                                                                 xO )c23Z)]  
    hI86WP9*  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 ;pW8a?  
    nd8<*ru$  
                                                                                     DPzW,aIgv  
    3D STED 轮廓 4@-tT;$  
    )- 3~^Y#r_  
                   :.*Q@X}-I  
                                                             7y|U!r"Y  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 p2gdA J  
    9<_hb1'  
    受激发射损耗效应                                                                           m| ,Tk:xH  
    dP8qP_77A~  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 kzZgNv#G;  
    PK:Lv15"r  
    '0+I'_(  
     Zmyq6.1q~  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           =Q_1Mr4O  
    ':4<[Vk  
     :b44LXKCP  
                                                                                     l[T-Ak  
    文件信息 E'f7=ChNF  
    U7x  
    @GKDSS4jv  
     pWRdI_  
    进一步阅读 7#E/Q~]'6  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     4@0aN6Os  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy |D)CAQn,  
    *LB-V%{|'  
    市场图片 |M7C=z='  
    ,"`20.Lv  
     G!I++M"  
     
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