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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    在线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 BAKfs/N  
    }%XNB1/`  
     /5J! s="  
                                                                           %5z88-\  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 np>*O}r*  
    ZcdS?Z2k  
    任务说明                                                                           ~RMOEH.o  
    MPGQ4vi&  
     BO[A1'>  
    Qu;AU/Q<([  
    多重光源                                                                           fO(.I  
       `$#64UZ>U1  
    iySmNI  
     F%Mlid;1  
    螺旋相位板                                                                           T%]: tDa  
    _D+7w'8h  
     `\.n_nM  
    `zsKc 6%  
    探测器插件                                                                           $@#nn5^IX  
    f9\7v_  
     I'yhxymZ;  
    _*`AGda  
    参数运行 $==hr^H  
    'Klz`)F  
                                                                                 |w>DZG!}1-  
    x208^=F\\  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： hB^"GYZ  
    )8N/t6Q  
    Usage of the Parameter Run Document RdY#B;  
                                                                                     ER|5_  
    非时序建模 Q;^([39DI  
    c9ZoO;  
                                                                               $qEJO=v  
    <w:fR|O  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Cn{UzSKfs  
    o1g[(zky  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 97&6iTYA  
                                                                                     [ z&y]~  
    总结 – 组件…           N4}h_mh^'  
    >l7 o/*4  
                                                                     :g\qj? o  
    -+4$W{OK*0  
    `}=Fw0  
     sy#Gb#=#  
    系统观感 L NE]#8ue  
    +?L~fM69B  
                                                                         onmO>q*  
    ?O3 G  
    Ln: y|t  
    发射&损耗激光 Y/hay[6  
    Y}[r`}={  
                                                                                 m[7a~-3:J  
    '1{~y3  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 [n^___7  
    %8-S>'g'  
                                                                                     5 QT9  
    3D STED 轮廓 mR{0*<  
    :kUH>O  
                   LnL<WI*Pq  
                                                             Ay_<?F+&  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 +u Lu.-N  
    [v&_MQ  
    受激发射损耗效应                                                                           pp-Ur?PM  
    N; hq  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 7oWv'  
    C/w;g3  
    /bb4nM_E/  
     LRI_s>7  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ML]?`qv '  
    1,mf]7k$  
     OGVhb>LO1  
                                                                                     `BvcI n4do  
    文件信息 xtnB: 3  
    /U`"|3  
    ?L $KlF Y  
     ,yT4(cMBk?  
    进一步阅读 y>o#Hq&qM  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     [J];  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy *kIJv?%_}  
    vrbS-Z<S9  
    市场图片 8e-{S~@W  
    bw[!f4~  
     9}\T?6?8pX  
     
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