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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 U {Xg#UN  
    BMMWP   
     `) s]T.-  
                                                                           [O92JT:li  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。  >sk vg  
    uzjP!qO  
    任务说明                                                                           HC4qP9Gs  
    T@0\z1,~S  
     x%HX0= (  
    >.^/Z/[.L  
    多重光源                                                                           `{BY {  
       kpFt  
    }: v&Nc  
     jinDKJ,n;  
    螺旋相位板                                                                           {z:aZ]QhKc  
    Kppi N+||  
     Jb+cC)(  
    _)AX/%^%  
    探测器插件                                                                           P:,@2el  
    ^]_[dqd  
     e%_2n=p~)%  
    wJ 0KI[p(S  
    参数运行 .;#Wf @V  
    BVAxeXO  
                                                                                 )xKZ)SxV  
    %dA6vHI,  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： >6xZF'4  
    H4l*  
    Usage of the Parameter Run Document Fo  K!JX*  
                                                                                     ;VVKn=X=S=  
    非时序建模 A|3'9iL{9  
    $2lrP]`>j.  
                                                                               -DWyKR= j"  
    c8'a<<sj  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 DL$O274uZ  
    9p| ;Hh:  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 1nHQ)od  
                                                                                     ECq(i(  
    总结 – 组件…           1?k{jt~  
    z  u53mZ  
                                                                     -2Bkun4Pt  
    tkQ#mipAj  
    jhU'UAn  
     ,+LX.f&/8!  
    系统观感 N$cm;G=]  
    s.VtmAH  
                                                                         L;jzDng<  
    K ?R* )_  
    }.+{M.[}  
    发射&损耗激光 l;+nL[%`  
    RRXnj#<g  
                                                                                 ~< ~PaP$=\  
    (6b*JQ^^  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 Fog4m=b`g  
    6} b1*xQ  
                                                                                     .K I6<k/  
    3D STED 轮廓 W|C>X=zTi  
    k9]M=eO  
                   &A}@@d  
                                                             c*fMWtPp  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Pn&!C*,  
    v@_^h}h/,=  
    受激发射损耗效应                                                                           ;!RS q'L1  
    F?h{IH f  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ;^fGQ]`4  
    suo;+T=`I  
    tsGt,]O30  
     'aj97b;lpG  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           {lNvKm)w  
    c~,OU7[  
     cJp:0'd  
                                                                                     }vx+/J  
    文件信息 h mijp1u  
    Dm^Bk?#(  
    h\]D:S  
     fv;3cxQp  
    进一步阅读 {nr}C4]o  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     l*l?aI  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy F},#%_4  
    ( L{>la!  
    市场图片 yUUg8xbpxF  
    bQTkW<7gh  
     ]H%S GQPn  
     
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