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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 O '`|(L  
    'HCRi Z<  
    mwN "Cu4t  
                                                                      
    9`5.0**  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 ~l. C -  
    ( ]0F3@k#s  
    任务说明                                                                           (Q ^=^s|  
    2V$Jn8v,`{  
    r'_#rl  
    rj4Mq:pJ  
    多重光源                                                                           Pth4_]US  
       ~E_irzOFP  
    6#Y]^%?uy  
    0;,Y_61  
    螺旋相位板                                                                           4>fj @X(3  
    w@O)b-b|w  
    d{) =E8wE  
    )"|wWu  
    探测器插件                                                                           ,KF>@3f  
    oL }d=x/  
    _ouZd.  
    yd'cLZd<}  
    参数运行 Zm|il9y4m  
    DT6 BFx  
                                                                            
    VkJTcC:1  
    dS \n 2Qb  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: )te_ <W  
    @{Fa=".Ch  
    Usage of the Parameter Run Document S;2UcSsQl  
                                                                                     a9_2b}t  
    非时序建模 -;RAW1]}Y$  
    gvo5^O+)HH  
                                                                          
    6W7,EIf  
    + iQ~ Y2Gh  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ;j(*:Nt1  
    ;A*sub  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing W~i0.rg|>  
                                                                                     f(K1 ,L:&7  
    总结 – 组件…           xlgT1b:6  
    <5CQ#^ cK  
                                                                
    sk0/3X*Q%  
    gh"_,ZhZt  
    zJ ;]z0O  
    sk~7"v{Y.  
    系统观感 E)X_  
    XuZgyt"=r  
                                                                    
    /BF7N3  
    9c1q:>|  
    (5[#?_~  
    发射&损耗激光  x}d5 Y  
    YYkgm:[  
                                                                            
    3=UufI  
    Qt^6w}&  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 M$f_I +  
    I>-}ys`[  
                                                                                     |BGzdBm^x:  
    3D STED 轮廓 `$3P@SO"  
    AP=SCq;  
                   \S~<C[P  
                                                        
    Z vyF"4QN  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 p{SIGpbR&  
    ;[Eso p  
    受激发射损耗效应                                                                           dPgA~~  
    gK dNgU  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 Gt!Hm(  
    =Q|s[F  
    i@<w"yNd_  
    W>P:EI1  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           *t={9h  
    H-X5A\\5  
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                                                                                     R~N%sn  
    文件信息 do%.KIk  
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    7FP"]\x  
    )%!X,  
    进一步阅读 mj9]M?]  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
    %U1HvmyK  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy >g[Wnzf  
    g|!=@9[dv  
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