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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 aSdh5?  
    IhnHNY]<g  
     )]WWx-Uf'  
                                                                           Mx{VN P  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 kR$>G2$!  
    Py7!_TX  
    任务说明                                                                           g?N~mca$  
    S$J}>a#Ry  
     RapHE; <  
    VH[r@Pn  
    多重光源                                                                           Y$xO&\&)  
       *z[G+JX  
    !<r+h, C  
     0q'd }DW  
    螺旋相位板                                                                           uo0g51%9  
    xw_VK1  
     h'VN& T,  
    wKF #8Y  
    探测器插件                                                                           J-*&&  
    OQzJRu)mF#  
     mr:;Wwd  
    <@i.~EL  
    参数运行 ,M2u (9  
    Ow7NOhw  
                                                                                 K&FGTS,  
    GMmz`O XN  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 50!/%  
    tP; &$y.8  
    Usage of the Parameter Run Document OLXkiesK{  
                                                                                     %Q]u_0P*  
    非时序建模 *M5 : \+  
    >! +.M9  
                                                                               Y.I-h l1<r  
    G| 7\[!R  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 DLMG<4Cd~  
    fDc>E+,  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing Gvo(iOU  
                                                                                     ,h21 h?6  
    总结 – 组件…           Y" 9 o  
    ?DcRD)X  
                                                                     x_9<&Aj6  
    nb(4"|8}  
    O+;0|4V%  
     (H*-b4]/  
    系统观感 [c4.E"  
    `-zdjc d  
                                                                         ?]%JQ]Gf*  
    FFXDt"i2  
    d_9Fc" C~  
    发射&损耗激光 Ke-Q>sm2Q  
    ||v=in   
                                                                                 `B+%W  
    0P`wh=")  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 Li ,B,   
    D|I(2%aC  
                                                                                     Tks;,C  
    3D STED 轮廓 QFoZv+|  
    A(duUl~  
                   `NA[zH,w3  
                                                             $,08y   
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 n+@}8;oeP  
    ];Whvdnv  
    受激发射损耗效应                                                                           1A^iUC5)  
    ,2S <#p!  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ^|}C!t+  
    >(z{1'f{  
    "?,3O2t  
     { frEVHw  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           1!8*mk_R{  
    6h>8^l  
     Qu]0BVIe  
                                                                                     s# w+^Mw$  
    文件信息 RBx`<iBe  
    vZ 4Z+;.  
    c?) pn9  
     ~J2-B2S!  
    进一步阅读 q?z6|]M|u  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     `.;7O27A^%  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy LoHWkNZ5:  
    N&NOh|YS  
    市场图片 %9M; MK  
    v,vTRrpK  
     2a.NWJS  
     
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