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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 Gdd lB2L)x  
    "3"9sIZ(  
     M#Vl{ b  
                                                                           ` qqUuFMM  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 8N|y   
    jz_\B(m9%  
    任务说明                                                                           `4'['x  
    )o<rU[oD]C  
     i(XcNnn6  
    )kSE5|:pi  
    多重光源                                                                           ]$'w8<D>t,  
       bt/u^E  
    Gmi w(T  
     "+2Hde1  
    螺旋相位板                                                                           MXbt`]`_  
    m 4Vh R_  
     e?%Qv+)W  
    ugtb`d{ Sl  
    探测器插件                                                                           RSLMO8  
    q1Vh]d  
     %{*}KsS`p  
    8lo /BGxS>  
    参数运行 .FS`Fh;  
    (#WE9~Sru  
                                                                                 AKVll  
    E.$1CGd+  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： M4rOnIJ  
    !YlyUHD  
    Usage of the Parameter Run Document uX-]z3+  
                                                                                     8kz7*AO  
    非时序建模 Y!C=0&p  
     xA DjQ%B  
                                                                               H[ DrG6GA  
    Jb'M/iG  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 HY.?? 5MH  
    $\xS~ w  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ]~:9b[G2  
                                                                                     f>Mg.9gJ(  
    总结 – 组件…           DS,"^K  
    $2=-Q/lM  
                                                                     }4PIpDL  
    p.9VyM  
    -v*wT*I1  
     Nj Ng=q  
    系统观感 8v7;{4^  
    V&x6ru#  
                                                                         }VlX!/42  
    /=9t$u|  
     }xcEWC\  
    发射&损耗激光 {c|=L@/  
    Sq,ZzMw  
                                                                                 #WD} XOA  
    Aen)r@Y:  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 zK`z*\  
    *xxG@h|5n  
                                                                                     ?:(BkY,K5  
    3D STED 轮廓 Fa`/i v  
    `}/&}Sp  
                   Hf( d x\5  
                                                             PT7L65  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 w,(e,8#:  
    0GW(?7ZC  
    受激发射损耗效应                                                                           &CCp@" +  
    q| p6UL9  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 yDBS : \  
    -EV_=a8[y  
    jX5lwP Q|F  
     @G  0k+  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           xy>~ 15  
    Vk/CV2  
     PaPQ|Pwz  
                                                                                     ?ic7M  
    文件信息 $gm`}3C<  
    N5u.V\F!z\  
    HCHZB*r[  
     |7Z7_YWs  
    进一步阅读 \; Io  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     wykk</eQ.i  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 1?\ #hemL  
    "f|\":\  
    市场图片 \(Uw.ri  
    ~W'>L++  
     MsMNP[-l  
     
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