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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 r^mP'#  
    ty|E[Ez1  
     wuCiO;w  
                                                                           LMf_wsp  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 QCFLi n+r  
    JzJS?ZF  
    任务说明                                                                           %O`e!p  
    Cpu L[|51  
     4=S.U`t7  
    5:%xuJD  
    多重光源                                                                           cF9bSY_Eh  
       )UA};Fus  
    &13qlc6  
     -t_t3aU|  
    螺旋相位板                                                                           Vu '3%~  
    (+d7cln  
     5t`< KRz)I  
    ]a )o@FI  
    探测器插件                                                                           XBE+O7  
    ld8E!t[  
     }{Ab:+aNd  
    ?El8:zt?|  
    参数运行 g5X;]%:  
    m?DI]sIv#  
                                                                                 /EF0~iy  
    >58N P1[k  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： 68 % = V>V  
    F+mn d,3  
    Usage of the Parameter Run Document 9MQ!5Zn  
                                                                                     E|OB9BOS  
    非时序建模 1zwk0={x-%  
    v#1}( hb  
                                                                               YqhZndktX  
    dWbSrl  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 (_h<<`@B  
    DPCB=2E  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing  J jRz<T;  
                                                                                     qPeaSv]W  
    总结 – 组件…           \vj<9ke&  
    -`nQa$N-  
                                                                     .{[+d3+,  
    (}ObX!,  
    .)L%ANf  
     "mlVs/nsyG  
    系统观感 &)[?D<  
    ~d]X@(G&  
                                                                         32nB9[l  
    S B2R  
    \1Tu P}P  
    发射&损耗激光 Dv~W!T i  
    [B<htD&  
                                                                                  -D*,*L  
    g\_J  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 WzD=Ol  
    nn[OC=cDN  
                                                                                     m)"gj**|y  
    3D STED 轮廓 {m%]`0  
    X{cFq W7  
                   D d['e  
                                                             (QS4<J"  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 .[mI9dc  
    8@b,>l$  
    受激发射损耗效应                                                                           @JB9qT  
    O5X@'.#rU  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 F|mppY'<J  
    'W'['TV  
    N_jpCCG~  
     P){b"`f  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ^j~CYzmt  
    '" MT$MrT  
     R( 2,1f=d  
                                                                                     vndD#/lXq  
    文件信息 py \KY R  
    3|++2Z{},  
    >|j8j:S[  
     vs=8x\W  
    进一步阅读 ~ 9Xs=S!  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     w3hG\2)[HS  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy b}&2j3-n,  
    LDX>S*cL  
    市场图片 "XKcbdr8-  
    su2|x  
     :8( "n1^  
     
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