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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 4Ub7T=LG  
    8&7zV:=  
     :{-/b  
                                                                           LS<*5 HWX  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Rf{YASPIw&  
    k+eeVy  
    任务说明                                                                           &sJ6k/l  
    @|d`n\%x  
     <CS,v)4,nH  
    7Ewq'Vu`y  
    多重光源                                                                            ]C-a[  
       PD^Cj?wm  
    a0`(* #P  
     lQ2vQz-J  
    螺旋相位板                                                                           "Q[?W( SA  
    S e!B,'C%  
     Z..s /K {  
    {w v{"*Q9Q  
    探测器插件                                                                           XU`vs`/   
    >PUT(yNL  
     'lgS;ItpKu  
    u)Vn7zh  
    参数运行 k !g%vx  
    2:1 kSR^Ky  
                                                                                 6 _#CvQ  
    uA\KbA.c;U  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： o4YF,c+>q  
    6+SaO !lR  
    Usage of the Parameter Run Document 58PL@H~@0  
                                                                                     8~iggwZ~h"  
    非时序建模  [4mIww%  
    2'}/aL|G  
                                                                               M{X; H'2  
    3o_@3-Y%  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 Rab7Y,AA  
    oox;8d4}y  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing stq%Eg?  
                                                                                     -g4 {:!*D  
    总结 – 组件…           r@G34Q C+  
    jB\Knxm v  
                                                                     ;@<e]Ft  
    c,5yH  
    1sXVuto  
     P2 z~U  
    系统观感 `m-7L  
    T{lK$j  
                                                                         F2',3  
    o_.`&Q6n  
    Gp1?drF6  
    发射&损耗激光 7Dz-xM_?  
    E&\ 0+-Dw  
                                                                                 Q'Y7PG9m~  
    "lKR~Qi  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 [9~6, ;6  
    =la~D]T*g  
                                                                                     y~py+:_  
    3D STED 轮廓 {BD G;e  
    #$ ,b )Uy  
                   W>E|Iv[o  
                                                             OJ<V<=MYZ  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 4l_~-Peh  
    ?rQIUP{D7  
    受激发射损耗效应                                                                           P:m6:F@hO  
    +\25ynM  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 Ji0FHa_  
    ]U.*KkQ  
    uVzvUz{b  
     @}_Wl<kn  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           +?GsIp@>jh  
    \mNN ) K@  
     LDj*~\vsq  
                                                                                     1raq;^e9  
    文件信息 _i2k$Nr  
    7K /quJ  
    0W]vK$\F*  
     +sx$%N  
    进一步阅读 i: VMC NH  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     B[;aNyd<  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy r!/<%\S  
    Ko %e#q-  
    市场图片 ZO]P9b  
    rchKrw  
     (vwKC D&  
     
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