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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 15小时前
    摘要 |l? ALP_g  
    !'gz&3B~h  
     A8RT3OiXA  
                                                                           V*m)h  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 q%'ovX(dm  
    ~^euaOFU 6  
    任务说明                                                                           IL=v[)en4  
    ZB2'm3'bh  
     NY;UI (<]  
    &59#$LyH`%  
    多重光源                                                                           /j)VES  
       ~ghz%${`  
    _9@?Th&_e  
     |)4$\<d  
    螺旋相位板                                                                           8k1 r|s@d  
    "^= [*i  
     rO`g~>-  
    vedMzef[@>  
    探测器插件                                                                           48ma&f;  
    KVcZ@0[S  
     z-gwNE{  
    Vtg/,1KQ  
    参数运行 R>U<8z"i  
    5p|@)  
                                                                                 -Wn.@bz6B  
    3.0c/v5Go  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅：  b:QFD|  
    0xxzhlKNL  
    Usage of the Parameter Run Document Q kZM(pG  
                                                                                     [4hO3):F  
    非时序建模 /kA19E4  
    U>+~.|'V9  
                                                                               huoKr  
    q-G|@6O  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 V0 F30rK  
    ]Z-oUO Z<k  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing N &[,nUd  
                                                                                     M&ij[%i  
    总结 – 组件…           Vrj1$NL%  
    euhZ4+  
                                                                     `zp2;]W  
    NN 6KLbC(  
    =b!J)]  
     @,4%8E5  
    系统观感 =]QH78\3  
    w;EXjl;X O  
                                                                         <gdgcvd  
    K~8tN ,~&  
    dl6v <  
    发射&损耗激光 daIL> c"  
    8KtgSash  
                                                                                 ~Ex.Yp8.  
    & fSc{/  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 VMIX$#  
    GWInN8.5  
                                                                                     U('<iw,Yy  
    3D STED 轮廓 a9Fm Y`  
    pRwGv  
                   3EVC8ue  
                                                              A<Z 5  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 %W4aKb?BT  
    m6r )Z5}f  
    受激发射损耗效应                                                                           [u9JL3  
    2ly,l[p8  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 '95E;RV&  
    Ydh<TF4!  
    q Iy^N:C2'  
     =*g$#l4  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           48 CI8[T  
    aGe(vQPi9  
     !wd'::C  
                                                                                     VL7S7pb_  
    文件信息 k&A7alw  
    AM[jL'r|  
    zNny\Z  
     )J+{oB[>b  
    进一步阅读 >4/L-y+  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     R6Zj=l[  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy QM ZUt  
    ;}WtJ&y=M  
    市场图片 IE)"rTI)b  
    8pPC 9ew\=  
     X&(ERY,h  
     
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