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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 l_x>.'a  
    \)PS&Y8n  
    dRTpGz  
                                                                      
    H/ub=,Ej*  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 [92bGR{  
    J1Y3>40  
    任务说明                                                                           ,-BZsZ0~  
    _j<,qi  
    <7X+-%yb;  
    D7$xY\0r  
    多重光源                                                                           Zn'y"@%t[  
       x[%% )[d  
    `RE1q)o}8M  
    &S# bLE  
    螺旋相位板                                                                           Q1'D*F4  
    g/,O51f'  
    wT\dzp>/  
    yDw^xGws  
    探测器插件                                                                           _d<\@Tkw  
    1'* {Vm M  
    bRAf!<3  
    wmPpE_ {  
    参数运行 ?Qs>L~  
    \'N|1!EO|t  
                                                                            
    d>7bwG+k  
    ;d  >  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: 6UJBE<ntj  
    -OP5v8c f  
    Usage of the Parameter Run Document %u|qAF2uS  
                                                                                     8|,-P=%t  
    非时序建模 :hxZ2O?5_  
    x9CI>l  
                                                                          
    QfM*K.7Sl  
    (.3L'+F  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 x]U (EX`t$  
    & ~[%N O  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ]j:Ikb}  
                                                                                     X]*W +  
    总结 – 组件…           `o*g2fW!  
    Qs{Qg<}  
                                                                
    3/@'tLtN  
    z95V 7E  
    _mL9G5~r  
    Z_Ma|V?6  
    系统观感 {1YT a:evl  
    D2Go,1  
                                                                    
    z:R2Wksg  
    &f qmO>M  
    _.06^5o  
    发射&损耗激光 fhn0^Qc"+  
    o6K BJx  
                                                                            
    FZmYv%J  
    hOMFDfhU  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 C12 7he  
    k*c:%vC!  
                                                                                     1,`x1dcO!A  
    3D STED 轮廓 @#H{nj Z  
    L{fP_DIa  
                   .Na>BR\F  
                                                        
    3]Lk}0atpL  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 *Ucyxpu~$  
    O x$|ZEh  
    受激发射损耗效应                                                                           O\KAvoQ%s  
    FvI`S>  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 lE|T'?/  
    }\ DQxHG  
    v,i:vT\~  
    nLfnikw&  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           YJ16vb9  
    '/ &"  
    -6tF   
                                                                                     Yg]f2ke  
    文件信息 >6DY3\  
    QT&{M #Ydn  
    ycAQPz}=I  
    8rpN2M 3h  
    进一步阅读 VDmd+bvJV  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF
     B-gr2-  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy S~Hj. d4/  
    "\=_- `  
    市场图片 eXaDx%mM  
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