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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 t!S ja  
    _5%NG 3c  
     ,-[e{=Cz  
                                                                           G{C27k>wa  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 g82_KUkB  
    Eh{]so  
    任务说明                                                                           ,dZ&i! @?  
    Rfuq(DwD6  
     GI ~<clhf  
    HXY,e$c#y  
    多重光源                                                                           eq<giHJM  
       yv&VK ht  
    A3jT;D9Y%  
     a9<&|L <  
    螺旋相位板                                                                           kl&9M!;:n  
    +2WvGRC  
     oI/jGyY;  
    Ny oRp  
    探测器插件                                                                           h_{//W[  
    2wKW17wj,  
     n@"h^-  
    E,fG<X{  
    参数运行 L4wKG&  
    Wdp?<U  
                                                                                 v\;hI5WY  
    B)1.CHV%<  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： Vu u2SS  
    IW1+^F9NEw  
    Usage of the Parameter Run Document a`:ag~op@&  
                                                                                     c(tX761qz  
    非时序建模 9N?BWv }  
    /'S@iq  
                                                                               x9&{@ ?o  
    pMfP3G7V  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 >gqd y*Bg  
    ! 4ZszQg  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing /6$8djw  
                                                                                     R"0fZENTG  
    总结 – 组件…           g/2eY$6Z  
    acXB vs  
                                                                     Ig*qn# Dd  
    pP`KI'aUN  
    lN<,<'&^.  
     p? q~.YY  
    系统观感 :mpR}.^hv  
    ND3(oes+;K  
                                                                         N=`xoF  
    mnwYv..ePz  
    ee9nfvG-  
    发射&损耗激光 H+VKWGmfG  
    N0:gY]o%  
                                                                                 iHp@R-g  
    x-Cy,d:YX  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 /61P`1y(J  
    xq.HR_\  
                                                                                     |6mDooTy  
    3D STED 轮廓 h.`U)6*?&N  
    %kcyE<c  
                   bkZ~O=uv$-  
                                                             FK8G BkQ!  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 b.<>CG'  
    g7-=kmr|V  
    受激发射损耗效应                                                                           c|s*(WljY  
    @L)=epC  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 !E0zj9 [ R  
    $h({x~Oj9  
    2I 2#o9(Ar  
     axRzn:f  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           RuW62QSq  
    ]Gm $0uS  
     Mk*&CNo3  
                                                                                     m _0D^e7#  
    文件信息 -\.'WZo`  
    XuQ7nlbnq  
    E27N1J+1  
     I^5T9}>Q  
    进一步阅读 gD[Fkq$]  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     e@-"B9~   
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy '}`|QJ  
    0NN{2"M$p  
    市场图片 BZXP%{njS  
    1D,$Az~.  
     ?H c~ 3  
     
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