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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 ~}EMk3  
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                                                                           tGvG  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 ^D eERB  
    l/TjQ*  
    任务说明                                                                           U4f5xUY0)  
    TxjYrzC  
     a7zcIwk '{  
    !U9|x\BqJ2  
    多重光源                                                                           )c n+1R  
       KqBk~-G  
    xsd_Uu*  
     d@`M CchCB  
    螺旋相位板                                                                           0R{dNyh{  
    u0aJu  
     [[PEa-992  
    g VQjL+_W  
    探测器插件                                                                           61puqiGG^  
    zJP6F.Ov!  
     Y}#h5\  
    ?0? R  
    参数运行 3bk|<7tl  
    |8mhp.7  
                                                                                 ,@1p$n  
    (" LQll9  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： d \x7Zw>  
    @1*ohdHH  
    Usage of the Parameter Run Document 4wC+S9I#E^  
                                                                                     ?]D"k4  
    非时序建模 yjfat&$  
    ~P~  
                                                                               06$!R/K  
    IDnC<MO>  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 6qcO?U  
    O3TQixE  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing PH"n{lW.T  
                                                                                     GKN%Tv:D_  
    总结 – 组件…           !x!07`+^u  
    [2"<W! p  
                                                                     o-}R?>  
    6-?66g mT  
    me[DmiM,  
     :Ad &$e g+  
    系统观感 0a-:<zm  
    9U$EJN_G  
                                                                         /~x "wo  
    =-_B:d;  
    5:'hj$~|\1  
    发射&损耗激光 R|wGU)KEc'  
    \[Z?&  
                                                                                 gy&[?m6M=  
    z dO#0t N  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 )M)7"PC  
    @|Rrf*J?%  
                                                                                     MEwo}=B  
    3D STED 轮廓 #1>X58I^  
    m1Y >Nj[f  
                   ABUSTf<  
                                                             sQMFpIrr  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ! u:Weoz  
    <=f}8a.R3  
    受激发射损耗效应                                                                           ]Kr `9r),  
    &hRvol\J  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 +nJUFc  
    qWmQ-|Py  
    liXdNk8  
     >nzdnF_&zW  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           _q~=~nub  
    "HPB!)C8(  
     ;3' .C~   
                                                                                     .'Vww  
    文件信息 XLH0 ;+CL{  
    M)U{7c$c7  
    uDEvzk42  
     O BN2 ) j  
    进一步阅读 .k,kTr$ S  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     gG/!,Q.Qh  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy LqA@&H  
    TYy.jFT-  
    市场图片 fl\ly `_  
    z<yU-m2h  
     R) c'#St  
     
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