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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 yH-&o,  
    \ [OB.  
     )@I] Rk?  
                                                                           [<U=)!Swg  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 R[l`# I  
    T^#d;A  
    任务说明                                                                           KzV|::S^  
    aW dI  
     xS%&l)dT  
    !y~nsy:&7x  
    多重光源                                                                           OET/4( C  
       E_A5KLP  
    *&IvEu  
     M0lJyz J  
    螺旋相位板                                                                           H.XyNtJ  
    }]dzY(   
     Uaux0W  
    Mx6 yk,  
    探测器插件                                                                           (n.IK/:  
    oKGF'y?A>  
     B.od{@I(Xp  
    !ck~4~J  
    参数运行 ]?T^tJ  
    qzORv  
                                                                                 PPV T2;9  
    Wd!Z`,R  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： s 7w A3|9  
    @<$m`^H  
    Usage of the Parameter Run Document G)NqIur*Z  
                                                                                     q({-C  
    非时序建模 YU6|/ <8  
    r*mSnPz\q  
                                                                               TAOsg0  
    U_'M9g{,<  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 9eHqOmz  
    E A55!  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing PE6,9i0ee  
                                                                                     7_Te-i  
    总结 – 组件…           QR(;a:  
    xbw;s}B  
                                                                     Q.jThP`p  
    73S N\  
    Q6URaw#Yt`  
     dQrz+_   
    系统观感 Y=Ic<WHR  
    A:y^9+Da  
                                                                         Oh10X.)i  
    }BT0dKx  
    /CyFe<t  
    发射&损耗激光 -{Ar5) ?='  
     _}JMBIq$  
                                                                                 Dpu?JF]  
    [OOQ0c~  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 PU%f`)  
    )f^^hEIS  
                                                                                     <VstnJo`Z  
    3D STED 轮廓 Nc[N 11?O  
     LDU4 D  
                   =vF!  
                                                             TUwX4X6m  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 tmBt[  
    9a+Y )?z  
    受激发射损耗效应                                                                           9* 3;v;F  
    {"$ [MYi:  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 b|E ZD3y  
    SvkCx>6/G  
    C,mfA%63  
     T+RC#&>  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           "Vl4=W)u  
    noz1W ]  
     w8$> 2  
                                                                                     (`#z@,1  
    文件信息 8b-mW>xsA  
    aqK+ u.H  
    h0dZr-c  
     !'[?cEog  
    进一步阅读 >)diXe}j  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     }!Pty25j  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy L[nDjQn"  
    1k)pJzsc  
    市场图片 Gl|n}wo$  
    H n]( )/  
     6yAZvX  
     
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