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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 Ltlp9 S  
    L*@`i ]jl  
     5{ c;I<0  
                                                                           fPR_ 3qgQ  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 (lk9](;L  
    <r%K i`u(p  
    任务说明                                                                           r $7.  
    ' \JE>#  
     6g(;2gY  
    L9GLj Rp-  
    多重光源                                                                           gf|uZ9{  
       _&gi4)q  
    KX) n+{   
     tKbxC>w  
    螺旋相位板                                                                           'Wlbh:=$  
    144Y.  
     Z 3BwbH  
    <Ap_#  
    探测器插件                                                                           iaGA9l<b  
    Z,&O8Jelf  
     'aSsyD!?<  
    0PzSp ]  
    参数运行 yD\q4G  
    rRTKF0+  
                                                                                 +! 1_Mt6  
    I _nQTWcm  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： ah>c)1DA*H  
    -y`Pm8  
    Usage of the Parameter Run Document b<h((]Q>^  
                                                                                     ]'.qRTz'\t  
    非时序建模 <Q[%:LD  
    _4{0He`q  
                                                                               'gwh:  
    u 3WU0Z`  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 <)qa{,GX\  
    kmQ:wf:  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing Vt`4u5HG  
                                                                                     ]U?nYppV  
    总结 – 组件…           tXE/aY*I  
    a>4/2#J  
                                                                     Xdvd\H=  
    7HkO:/  
    Z{8%Cln  
     NdK`-RT  
    系统观感 cVi_#9u"  
    "4b{YWv  
                                                                         gtKih  
    %bcf% 7  
    ,&[o:jTk  
    发射&损耗激光 2&hv6Y1  
    E|=x+M1sH  
                                                                                 #}A"yo  
    oodA&0{)d  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 KOixFn1  
    <bcf"0A  
                                                                                     g *5_m(H  
    3D STED 轮廓 175e:\Tw  
    {i>AQ+z61f  
                   }T_"Vg q  
                                                             tI^91I  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 GRc)3 2,  
    V_i&@<J  
    受激发射损耗效应                                                                           r CJ$Pl9R  
    yY]x' 'K  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 r^k+D<k[7  
    L7ae6#5.  
    )xp3 ElH  
     {-)^?Zb @  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           g? vz\_  
    0>[]Da}  
     +9/K|SB{ $  
                                                                                     tY$@,>2v  
    文件信息 h-p}Qil,  
    `8ob Xb  
    '`8 ^P  
     :ok.[q  
    进一步阅读 W@!qp  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     mJ%^`mrI  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 5Q"yn2b4  
    ?;#Q3Y+  
    市场图片 &5}YTKe}|  
    =1Plu5  
     %XR(K@V  
     
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