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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 \r{wNqyv  
    L>WxAeyu1K  
     62.Cq!~  
                                                                           *sB'D+-/  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 @gf <%>  
    HA}q.L]#  
    任务说明                                                                           L[Y$ `e{zd  
    {2 T:4i5  
     K%/\XnCY  
    >0 o[@gJl  
    多重光源                                                                           <6hs<qXqi  
       Yc~lYz+b  
    2sG1Hox  
     | a i#rU  
    螺旋相位板                                                                           }uaFmXy3  
    =s'H o  
     3xP<J)S0  
    l& sEdEA  
    探测器插件                                                                           ;QCGl$8A  
    Lp}V 94xT  
     B>d49(jy  
    b%@9j;  
    参数运行 TPkP5w  
    2Q%M2Ua  
                                                                                 [4B (rra  
    Nknd8>Hy+  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： glM42s  
    r]QeP{  
    Usage of the Parameter Run Document v1}ijls  
                                                                                     =Ov,7<8o  
    非时序建模 eW3?3l`fvt  
    SbMRrWy  
                                                                               "la0@/n  
    k`[>B k%b  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 wkPomTO  
    XPt>klf  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ^Dfqc-]  
                                                                                     D(TfW   
    总结 – 组件…           0N4ZV}s,d  
    ~fcC+"7q/  
                                                                     MOB'rPIUI  
    " ? V;C  
    gr.G']9lNq  
     rXTdhw?+  
    系统观感 @RoU   
    TOSk+2P  
                                                                         wu{%gtx/;^  
    Qch'C0u  
    6 9uDc  
    发射&损耗激光 #Ak9f-pf  
    |r+hj<K  
                                                                                 c1*^ \   
    hA&m G33  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 YCzH@94QeV  
    ~\u>jel  
                                                                                     ^$oEM0h  
    3D STED 轮廓 9 v ,y  
    E J6|y'  
                   V!+<  
                                                             f!GFRMM1  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 LT,zk)5  
    P$clSJW  
    受激发射损耗效应                                                                           1O)m(0tb[  
    76c:* bZ  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 'q8:1i9\[  
    Y~lOkH[z  
     @_WZZ  
     .)FFl  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           !@+4&B=  
    #xhl@=W;  
     y{tM|  
                                                                                     iy_3#x5>  
    文件信息 uBM%E OE  
    su8()]|0x  
    1x+w|h  
     '^2bC  
    进一步阅读 W7T2j+]  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     `<R^ZL,  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy i(q a'*  
    akgvV~5  
    市场图片 SvQj'5~<  
    "!Hm.^1  
     WO+>W+|N  
     
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