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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 'XW[uK]w)  
    :Y? L*  
     qY,z,o AF  
                                                                           {u!Q=D$3  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 Zl,c+/  
    7  s+j)  
    任务说明                                                                           #Z;6f{yWf  
    8H2zM IB  
     I+JWDYk  
    ku2g FO  
    多重光源                                                                           q%H`/~AYM  
       TcB^Sctf  
    N5W;Zx]  
     /"~ D(bw0=  
    螺旋相位板                                                                           1 zo0/<dk  
    ^3>Qf  
     rw CFt6;v  
    Qu 7#^%=  
    探测器插件                                                                           $O\I9CGr$  
    p#14  
     qcN{p7=0  
    g>k"R4  
    参数运行 :ik$@5wp  
    gK&MdF*  
                                                                                 [G.4S5FX.]  
    +jpaBr-O#  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： CsJ38]=Mt  
    i|`b2msvd  
    Usage of the Parameter Run Document D\~s$.6B  
                                                                                     +&AKDVmx  
    非时序建模 [{s 1= c  
    Vki'pAN  
                                                                               sObH#/l`  
    n jfh4}g:  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 /KL;%:7  
    {c 82bFiv  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing FWi c/7  
                                                                                     4=; . <  
    总结 – 组件…           ^[UWG^d  
    M-#OPj*  
                                                                     \>B$x@-wg  
    |3Fo4K%+  
    $A4rdhvd  
     =)h<" 2  
    系统观感 qcNu9Ih  
    s!lLdR[g  
                                                                         /]xu=q2  
    |*G$ilu  
    9EPE.+ns  
    发射&损耗激光 fX:)mLnO/  
    RFsd/K;Zp  
                                                                                 n;Nr[hI  
    4t C-msTf  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 $ 8"we  
    t)#d R._q  
                                                                                     \2UtT@3|C  
    3D STED 轮廓 a&sVcsX  
    #!A'6SgbkM  
                   f *Xum[  
                                                             ^#6"d+lp  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Lip(r3  
    {Df97n%h;  
    受激发射损耗效应                                                                           -\6";_Y  
    BLepCF38  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 \d"uR@$3mG  
    F!>92H~3G  
    g6s&nH`Z2  
     !=)R+g6b  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           _f"HUKGN  
    s8r|48I#;  
     d`XC._%^J  
                                                                                     n+sV $*wvS  
    文件信息 A:-MRhE9X  
    v+), uj  
    TO,XN\{y  
     1WTDF  
    进一步阅读 `Kt]i5[ "  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     slQxz;t  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy ""Ub^:ucD  
    _mEW]9Sp  
    市场图片 n?UFFi+a  
    D2,2Yy5 y  
     JU6PBY~C'  
     
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