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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 =6B I[_0  
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                                                                           B|SX?X  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 BXr._y, cr  
    \8`^QgV`@  
    任务说明                                                                           ]CgZt' h{  
    aq8mD^j-&  
     `7'=~BP?X  
    WiFZY*iu5  
    多重光源                                                                           Rr>""  
       kaVYe)~  
    K555z+,'e  
     /P*ph0S-  
    螺旋相位板                                                                           >Yfo $S_  
    sE0,b  
     4<U6jB5  
    PAu/iqCH  
    探测器插件                                                                           K_V$ktL  
    /7C %m:  
     42 Sk`  
    e3kdIOu5  
    参数运行 x2+M0 }g  
    G[!<mh4h|  
                                                                                 _x?S0R1  
    dZ\T@9+j+  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： YHr<`Q</  
    :#UN^"(m}  
    Usage of the Parameter Run Document JDBNi+t  
                                                                                     K|.!)L  
    非时序建模 \fL:Ie  
    5<?/M<i  
                                                                               G)\6W#de4  
    m`/!7wQs  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 SMh[7lU`  
    YQ5d!a.  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing fh e%5#3  
                                                                                     k!m9 l1x  
    总结 – 组件…           <(caY37o6)  
    +#ANc;2g  
                                                                     ;EfREfk  
    w~VqdB  
    L@6T~  
     c(0Ez@  
    系统观感 Z6oA>D  
    +4k7ti1Qb  
                                                                         z=VL|Du1OT  
    WhR'MkfL  
    44cy_  
    发射&损耗激光 X !l#1  
    R8R,!3 N  
                                                                                 T13Jno  
    x)o`w"]al  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 /<oBgFMoJ  
    CT#N9  
                                                                                     d<4q%y'X{  
    3D STED 轮廓 KmRxbf  
    :[7.YQ   
                   L\X 2Olfz1  
                                                             ziui  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 SiSx ym  
    kc70HrG  
    受激发射损耗效应                                                                           7 {#^ zr  
    5R7DD5c[  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 "+J[7p}`@  
    $WK~|+"{>  
    =qVD"Z]z  
     dz Z75  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           rui]_Fn]I  
    Se %"C&  
     | WMq&-$D  
                                                                                     Vt D:'L-  
    文件信息 5A=FEg  
    xu7Q^F#u  
    Gfn?1Kt{  
     4I^8f||b_  
    进一步阅读 A&6qt  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     }~`l!ApD  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy h*\/{$y  
    ZJ|'$=lR  
    市场图片 " tUF,G(<  
    IQ"9#{o  
     LdM9k(  
     
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