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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2025-06-25
    摘要 mF@D O$  
    W<OO:B.ty  
     nTH!_S>b(Y  
                                                                           n||!/u)*  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 H\RuYCn2G  
    2\L}Ka|v  
    任务说明                                                                           1Jn:huV2  
    .ta*M{t  
     %q5iy0~P  
    Z<~^(W7h  
    多重光源                                                                           O\[Td  
       ^ ^R4%C  
    RWK##VHK  
     VkDFR [k_  
    螺旋相位板                                                                           hP]zC1s  
    @V5'+^O  
     V[BlT|t  
    #Cz6c%yK  
    探测器插件                                                                           ,';+A{aV  
    ;WpPdR2  
     ^><B5A>;  
    n:5*Tg9  
    参数运行 "Gm:M  
    0CS80 pC  
                                                                                 G9uWn%5r  
    wJF Fg :  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： d8T,33>T  
    l5d> YTK+5  
    Usage of the Parameter Run Document 2\1\Jn#q  
                                                                                     QWWoj[d#  
    非时序建模 SsF 5+=A  
    V7 dAB,:  
                                                                               DUK.-|a7  
    BA+:}81&<q  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 3kBpH7h4  
    rO`n S<G  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 7OOod1  
                                                                                     R(sa.Q\D4  
    总结 – 组件…           /+F|+1   
    |uE _aFQs  
                                                                     P!)k4n  
    %C8fv|@:f  
    D3emO'`gQ  
     =7Y gES  
    系统观感 5bzYTK&-  
    _\Cd.  
                                                                         iAlFgOk'  
    AH(O"v`  
    xR, ;^R|C  
    发射&损耗激光 8@a|~\3-  
    WxS=Aip'  
                                                                                 9N'um%J3%s  
    {l7@<xZ??M  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 8c'0"G@S  
    jdYv*/^  
                                                                                     ^Y:Q%?uB/  
    3D STED 轮廓 \'L6m1UZ%  
    r4c3t,L*$I  
                   =c8U:\0  
                                                             )LYj,do  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 $u4esg  
    uXNf)?MpA  
    受激发射损耗效应                                                                           @zJ#16V i  
    7=ZB;(`L1  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 | We @p  
    ^IGTGY]s  
    nWK"i\2#G  
     TJB0O]@3  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           (t9qwSS8z  
    B!le=V,@,  
     ZtEHP`Iin  
                                                                                     [<sBnHbvQ.  
    文件信息 _+8$=k2nM  
    XY| -qd}A  
    'eo2a&S2D  
     ZH%[wQ~4  
    进一步阅读 V]PTAhc  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     5hpb=2  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy U<r<$K  
    *k'9 %'<  
    市场图片 F ,{nG[PL  
    _}!Q4K  
     BsB}noN}  
     
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