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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 %i@Jw  
    yTh60U  
     \<x{U3q5  
                                                                            &W? hCr  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 o_?A^u  
    54%h)dLDy  
    任务说明                                                                           *7K)J8kq  
    gF&HJF 0x  
     H~~>ut6`  
    e`;U9Z  
    多重光源                                                                           U_Am Riy  
       #RP7?yGM,  
    y5N,~@$r  
     xB,(!0{`  
    螺旋相位板                                                                           =QW:},sp  
    rNeSg=j  
     .h\[7r  
    $GX9-^og=T  
    探测器插件                                                                           W(jP??up  
    CChCxB  
     *Zz hN]1  
    ){"-J&@?  
    参数运行 ~4u[\&Sh  
    @H|3e@5([  
                                                                                 9pq-"?vHY0  
    jmva0K},SE  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： v9l|MI15V  
    (zhi/>suG  
    Usage of the Parameter Run Document |v= */e  
                                                                                     'L ]k \GO  
    非时序建模 2qDVAq^@  
    I 2*\J)|f  
                                                                               0uS6F8x@  
    OM#eJ,MH<)  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 H]&^>Pvh  
    ~\[\S!"  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing fz`\-"f]  
                                                                                     hV[=  
    总结 – 组件…           jHBP:c  
    8B|B[,`  
                                                                     }XIUz|  
    lwp(Pq  
    p|VgtQ/ )%  
     Hy#<fKz`!  
    系统观感 WcKL=Z?(  
    o 9{~F`{p  
                                                                         ~"i4"Op&  
    ^y3snuLtE  
    /|aD,JVN"  
    发射&损耗激光 AJR`ohh  
    T`SpIdzB.  
                                                                                 ,|Lf6k  
    xGo,x+U*  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 z*OQ4_  
    ,-_\Y hY>  
                                                                                     Nt P=m @  
    3D STED 轮廓 Nm,9xq  
    [5$Y>Tr!  
                   aW7)}"j4  
                                                             }pL#C  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 tU, >EbwO  
    GN@(!V#/4  
    受激发射损耗效应                                                                           I-o |~  
    iBy &#^  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 Mh*^@_h?  
    Y+ea  
    6 xAR:  
     \KT}T  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           q8P$Md-=b1  
    iK <vr  
     )|CF)T-  
                                                                                     @G:aW\Z  
    文件信息 8@- UvT&o  
    >Sua:Uff  
    T{Y;-m  
     Cz]NSG5  
    进一步阅读 `w/`qG:dK  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     WwYy[3U  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy :;u?TFCRx  
    kPg| o3H  
    市场图片 3 CArUP  
    L>1i~c&V  
     8^ezqd`  
     
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