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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 OG0ro(|dI  
    (gz|6N  
     _)lK.5  
                                                                           6VRVk7"  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 2Ask]  
    k5W5 9tz  
    任务说明                                                                           3vDV   
    NeUpl./b  
     VM|8HR7U  
     Q"%L  
    多重光源                                                                           OpYq qBf_  
       dDAdZxd  
    61CNEzQ  
     !i{@B  
    螺旋相位板                                                                           }?"f#bI  
    kf^Wzp  
     UI |D?z<  
    h|_G2p^J+"  
    探测器插件                                                                           e(j"u;=  
    lYU_uFOs\  
     2x'JR yef  
    ptYQP^6S[  
    参数运行 L2AZ0E"ub  
    [96|xe\s  
                                                                                 "!r7t4  
    zaR~fO  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： [BmondOx  
    G`gYwgU;  
    Usage of the Parameter Run Document  XW`&1qx  
                                                                                     V<P@hAAr  
    非时序建模 qDOx5.d  
    v:<u0B-)$  
                                                                               UP%X`  
    Va?wG3w  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 8V.x%T  
    G,$RsP  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing B3e{'14  
                                                                                     P#"vlNa  
    总结 – 组件…           F6YMcdU  
    /tx_I(6F?|  
                                                                     Uo5l =\  
    yAXw?z!`O  
    ppfBfMX  
     =@&]PYv  
    系统观感 3>/Yku)t  
    (N0G[(>  
                                                                         `QAotSO+  
    "P'W@  
    $v$~.  
    发射&损耗激光 ;g7 nG{  
    1/JgirVA  
                                                                                  jats)!:  
    Mryi6XT  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 {BDp`uZ  
    { ~FYiX  
                                                                                     r4D6g>)h1q  
    3D STED 轮廓 @va)j   
    jW"C: {Ol;  
                   qP*$wKY,  
                                                             f4CwyL6ur  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 VO/" ot  
    dGTAZ(1W  
    受激发射损耗效应                                                                           n"-cX)  
    Hq< Vk.Nk  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 Ri"3o  
    ]7fqVOiOu  
    N@)tU;U3O  
     % )?$82=2  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           83Bp_K2\  
    ;HgV(d#X  
     O.  V!L  
                                                                                     ^t?P32GJ  
    文件信息 tAPqbi$a  
    a<rk'4,8a  
    f'TdYG  
     b-;+&Rb  
    进一步阅读 X-e)w  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     cc Z A  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy -_4U+Cfmtl  
    {xMY2I++  
    市场图片 d {T3  
    k#w[G L|T  
     ,ZC^,Vq  
     
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