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    [技术]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 06-25
    摘要 HvITw%`  
    l:!4^>SC  
     /o<tmK_m  
                                                                           $ Cr? }'a  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 69Y>iPRU  
    R~-r8dWcw  
    任务说明                                                                           YF{KSGq  
    %cM2;a=2  
     # ;,b4O7@  
    )^&,[Q=i  
    多重光源                                                                           `r; .  
        b;!oPT  
    8T5s6EmIOW  
     O5PCR6U  
    螺旋相位板                                                                           X&^8[,"  
     (-\ ,t  
     h[()!\vBy  
    cmQLkT"#K  
    探测器插件                                                                           t I9$m[  
    PVAs# ~  
     (7nWv43  
    Dk#$PjcRE  
    参数运行 v})0zz?,1  
    K5x&:z  
                                                                                 "FC;k >m  
    =bUVGjr%96  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： s[:e '#^  
    j)Z3m @Ii5  
    Usage of the Parameter Run Document .tB[8Y=J  
                                                                                     U8?%Dq%i  
    非时序建模 l?_Iu_Qp  
    B\2<r5|QG  
                                                                               OQ<|Xd I$  
    X*F#=.lh  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 )W&H{2No  
    dMsX}=EI<  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing 4ze-N8<[  
                                                                                     .M_[tl  
    总结 – 组件…           B7qm;(?X&  
    JLT ^0wBB  
                                                                     \WD}@6) ~  
    8U B-(~  
    "Vp+e%cqG  
     TY"=8}X1  
    系统观感 gIS<"smOo  
    ukV1_QeN [  
                                                                         qw[)$icP  
    d$<HMs:o@  
    >JVZ@ PV H  
    发射&损耗激光 s OD>mc#%Y  
    VsOn j~@  
                                                                                 jGM~(;iw6i  
    e:IUO1#  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 fZ6lnZ  
    $b;9oST  
                                                                                     [3++Q-rR=  
    3D STED 轮廓 #SQao;>  
    n~ \"W  
                   Y5fwmH,a-  
                                                             E1:{5F5/  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 5haJPWG|'  
    ;5 cg<~t  
    受激发射损耗效应                                                                           79<{cexP  
    DPn]de:e  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 IbQ3*  
    %-?HC jT  
    g W'aK>*c  
      ^G{3x  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           [ aj F  
    G"0YCi#I|  
     j{EN %  
                                                                                     uW!',"0ER  
    文件信息 D`3m%O(?  
    Ia:n<sZU  
    k}y1IW+3  
     yhQv $D,^f  
    进一步阅读 3dNOXk, #  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     )BudV zg  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy po+>83/!oq  
    TI:-Y@8  
    市场图片 #(-V^ T  
    'mj0+c$  
     z c N1i^   
     
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