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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 KQ9:lJKr  
    ^LC5orO  
    $~~=SOd0  
                                                                      
    m&A/IW,.  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 H_8@J  
    ?n@PZL= ]  
    任务说明                                                                           E>6zwp  
    v*BA\&  
    nC&rQQFF  
    W'0wTZG  
    多重光源                                                                           Z*ZG5e  
       )sS< %Xf  
    {G{@bUG]p  
    $qrr]U  
    螺旋相位板                                                                           t=e0z^2i+  
    dna f>G3  
    vp_$6  
    #i ]@"R  
    探测器插件                                                                           2.lnT{  
    d,)F #;^5  
    g*tLqV  
    <zDe;&  
    参数运行 }.gg!V'9w  
     7:p]~eM)  
                                                                            
    `Ys })Pl  
    Jb$z(?S  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: Vut.oB$ ~  
    h?1pGz)[C  
    Usage of the Parameter Run Document vaxg^n|v9  
                                                                                     0F~9t !  
    非时序建模 {Jy%h8n*  
    O#U"c5%  
                                                                          
    P< &/$x6  
    1aDDl-8,  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 +8Px` v1L  
    M!jW=^\  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing aw4+1.xy  
                                                                                     .>nd@oU  
    总结 – 组件…           -*Pt781  
    1*jL2P]D  
                                                                
    %7@H7^s}9  
    i|O7nB@  
    B*AMo5  
    w:LCm `d  
    系统观感 .5ycO  
    D vKM>P%|  
                                                                    
    *Fc&DQT(  
    ppD ~xg]  
    g|HrhUT;  
    发射&损耗激光 w +Z};C  
    UKBMGzu2:  
                                                                            
    c\'pA^m 6  
    Iq=B]oE  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 &;skB.  
    iQIw]*h^  
                                                                                     Q(IS=  
    3D STED 轮廓 3# (5Kco  
    yfW^wyDd2o  
                   V<pqc&f .  
                                                        
    16Y~5JAc  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 K{ P#[X*5  
    DmrfD28j~F  
    受激发射损耗效应                                                                           H7= z%Y9y  
    S}f<@-16P  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 /#=J`*m_  
    FlG^'UD  
    I}v#r8'!  
    !dH&IEP~  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           gWo~o]f  
    PPO<{  
    Lp WEu^j  
                                                                                     mlWIq]J  
    文件信息 90ag!   
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