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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 0Ilvr]1a4  
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    n >PM_W  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 %vYlu%c<  
    9QZwUQ  
    任务说明                                                                           bK%tQeT  
    |/\1nWD  
    7{F9b0zwk  
    [ \n.[4gq"  
    多重光源                                                                           }gRLW2&mR>  
       \1'R}B@;  
    _H<OfAO  
    G6mM6(Sr  
    螺旋相位板                                                                           >,vW  
    -mo ' $1  
    rB|:r\Z(jG  
    ~cj:AIF  
    探测器插件                                                                           (`/i1#nR  
    |RXC;zt9s  
    ]!o,S{a&  
    U I|@5:J  
    参数运行 8&hn$~ate  
    Cy'W!qH  
                                                                            
    *<QL[qyV  
    TiEJyd`P  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: S%#Mu|  
    Eakjsk  
    Usage of the Parameter Run Document IVODR  
                                                                                     K :ptfD  
    非时序建模 Dq 4}VkY  
    Jn&>Z? @  
                                                                          
    R:x04!}  
    |sM#g1D@  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 D ,^ U%<`  
    , )3+hnFY  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing vz5 RS  
                                                                                     g]JI}O*5  
    总结 – 组件…           5z]KkPQ  
    )X$n'E  
                                                                
    g~u!,Zc  
    Z i&X ,K~  
    yE{UV>ry  
    i.,B 0s] Z  
    系统观感 q`zR6  
    iPNs EQ0We  
                                                                    
    vu >@_hv  
    ~36XJ  
    uRhH_c-6C  
    发射&损耗激光 Ll48)P{+}V  
    v3#47F)  
                                                                            
    s_kd@?=`x  
    (:]iHg3  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 824%]i3  
    vtjG&0GSK  
                                                                                     H}rP{`m  
    3D STED 轮廓 y%Ah"UY  
    :PkSX*E[q  
                   nwH|Hs riU  
                                                        
    Ia" Mi+{  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 ueo3i1  
    #R| 4(HlL  
    受激发射损耗效应                                                                           s#49pDN  
    l%/,Ef*3  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 X)5O@"4 ?  
    ^S$w,  
    v9kzMxs,  
    w` :KexD+  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           ^r$5];n  
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    JDlIf  
                                                                                     wu'60po  
    文件信息 B)*%d7=x  
    N?:S?p9R@  
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