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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 F#b^l}  
    O$eNG$7  
     1s-dqHz"s  
                                                                           s+m3&(X  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 IL0e:-@!0  
    UY5wef2sF  
    任务说明                                                                           bwR$9 10b  
    ,|}}Ml  
     xdLMy#U2  
    P^3`znq{  
    多重光源                                                                           cMU"SO  
       s78MXS?py  
    6 4,('+  
     !l(D0 C  
    螺旋相位板                                                                           F>F2Yql&W  
    &u`]Zn   
     T0;8koj^_  
    PEr &|H2  
    探测器插件                                                                           nmo<t]  
    M&[bb $00j  
     !{1;wC(b  
    c1ga{c`Z  
    参数运行 K0aT(Rc e  
    WrHY'  
                                                                                 A:$4cacu9  
    eG_@WLxwD  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： m{gw:69h  
    #lfW0?Y'  
    Usage of the Parameter Run Document 88&M8T'AP  
                                                                                     |LLDaA-=0  
    非时序建模 JW},7Ox  
    tE8aL{<R  
                                                                               f&L3M)T  
    /2f  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 6!Q,X Hs  
    JT p+&NS  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing g:fkM{"{  
                                                                                     Jn&^5,J]F8  
    总结 – 组件…           |1pD n7  
    Ro@ =oyLE  
                                                                     S[;d\Z]~  
    XiL[1JM  
    G"F)t(iX  
     6}cN7wnm j  
    系统观感 OQ&'3hv{  
    "h5.^5E6  
                                                                         h'nXV{N0  
    V7"^.W*  
    GU|(m~,`  
    发射&损耗激光 0z$::p$%u  
    _Rb>py  
                                                                                 t-i\gq^  
    RsW4 '5  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 TCR|wi] kW  
    z*)kK  
                                                                                     x~JOg57up  
    3D STED 轮廓 Js<DVe,  
    "x0/i?pqa  
                   Q*N{3G!  
                                                             5c\dm  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 m%cwhH_B  
    S}P rgw/  
    受激发射损耗效应                                                                           [X 9zrGHt  
    FN/siw(?3  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 gtnu/ Q  
    hkB|rhJgm  
    050V-S>s  
     ?_7iL?  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           aH_0EBRc  
    $H`{wJ?2(  
     fZp3g%u  
                                                                                     |=:<[FU  
    文件信息 w! PguP  
    ?IG[W+M8  
    s6QD^[  
     w$Z%RF'p  
    进一步阅读 3T/&T`T+c  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     )x<BeD  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy j[A:So  
    \hWac%#  
    市场图片 NX5$x/uz  
    p^1~o/  
     :=*V i`  
     
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