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摘要 KQ9:lJKr ^LC5orO
$~~=SOd0 m&A/IW,. 受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 H_8@J
?n@PZL= ] 任务说明 E>6zwp v*BA\&
nC&rQQFF W'0wT ZG 多重光源 Z *ZG5e )sS<%Xf {G{@bUG]p $qrr]U 螺旋相位板 t=e0z^2i+ dnaf>G3
vp_ $6 #i]@"R 探测器插件 2.lnT{ d,)F #;^5
g*tLqV <zDe;& 参数运行 }.gg!V'9w
7:p]~eM)
`Ys })Pl Jb$z(?S 为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: Vut.oB$
~ h?1pGz)[C Usage of the Parameter Run Document vaxg^n|v9 0F~9t! 非时序建模 {Jy%h8n* O#U"c5%
P<&/$x6 1aDDl-8, 将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 +8Px` v1L M!jW=^\ Channel Setting for Non-Sequential Tracing aw4+1.xy .>nd@oU 总结 – 组件… -*Pt781 1*jL2P]D
%7@H7^s}9 i|O7nB@
B*AMo5 w:LCm `d 系统观感 .5ycO DvKM>P%|
*Fc&DQT( ppD~xg] g|HrhUT; 发射&损耗激光 w+Z};C UKBMGzu2:
c\'pA^m6 Iq=B]oE 光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 &; skB. iQIw]*h^ Q(IS= 3D STED 轮廓 3# (5Kco yfW^wyDd2o
V<pqc&f. 16Y~5JAc 注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 K{P#[X*5 DmrfD28j~F 受激发射损耗效应 H7=z%Y9y S}f<@-16P 为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 /#=J`*m_ FlG^'UD
I}v#r8'! !dH&IEP~ VirtualLab Fusion 技术 gWo~o]f PPO<{
Lp WEu^j mlWIq]J 文件信息 90ag! 6)$N[FNs
Umt ia~x=& @b{u/:y 进一步阅读 E<SEFn • Simulation of Multiple Light Source in VLF ]+dl=SmF • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy _q_[<{# yjR
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