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摘要 l2LO,j} U}-hV@y
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-K5u5l} 受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 !ZN"(0#qz 0gKSjTqo 任务说明 dpcv'cRfw ~?lmkfy
pD6a+B\;k <2w41QZX 多重光源 ,fs>+]UY3 1~*JenV- 4}^\&K&t{ ;q2e[ y 螺旋相位板 yjChnp
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3.04Toq! "3a_C,\ 探测器插件 g\?7M1~ /gLi(Uw
pW2-RHGJY g6q67m<h 参数运行 O#b%&s"o .iEzEmu
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为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: R<8!lQ4s {(`xA,El Usage of the Parameter Run Document =q*j". < &28%~&L 非时序建模 nnnq6Z} q6N6QI8/
Q-f?7*> \&X*-T[]j 将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ~@ hiLW 5!d'RBO Channel Setting for Non-Sequential Tracing C%kIxa) K(p6P3Z 总结 – 组件… 4VfZw\^ R;2
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%u02KmV. SW_jTn#x 发射&损耗激光 '#@tovr R8<P}mv
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"% 光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 4z> SI\Ss ^N:bT;;$nZ [&a=vE 3D STED 轮廓 @a}jnl(2 %.VFj7J
ua>YI M[7$cfp-Y~ 注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 `E2HQA@ Ow4H7sl 受激发射损耗效应 +LsACSB |(\T;~7' 为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 dw]jF=u c.eA]m q
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