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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 2/&=:,"t,B  
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     J=` 8  
                                                                      
    msBoInhI  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 {N4 'g_  
    g,Ob/g8uc  
    任务说明                                                                           Nn LK!Q  
    8R MM97@1Q  
    XV]N}~h o`  
    q`*.F#/4c  
    多重光源                                                                           @]l|-xGCWn  
       o[ZjXLJzV  
    W%L'nR~w$  
    6!\V|  
    螺旋相位板                                                                           J!uG/ Us  
    s2O()u-  
    QLY;@-jF$  
    zZCl]cql  
    探测器插件                                                                           tbS hSbj  
    {-4+=7Sg1  
    wL0[Slf}  
    n _K1%  
    参数运行 MQoA\  
    g04^M (  
                                                                            
    #X-C~*|>j  
    I3Vu/&8f|  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: _ $F=A  
    oco,sxT  
    Usage of the Parameter Run Document ^~~Rto)Y  
                                                                                     //7YtK6  
    非时序建模 UIAazDyC  
    X:i?gRy"  
                                                                          
    HMd?`  
    )\1>)BJq  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 2I B{FO/  
    ,Cr%2Wg-  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing ;J W ]b]  
                                                                                     ]o] VS  
    总结 – 组件…           8_%GH}{  
    JvAXLT  
                                                                
    spa :5]B  
    Lf9hOMHx  
    rI$NNk'A  
    y0xBNhev  
    系统观感 Bp^LLH  
    wkp2A18n  
                                                                    
    U"Gx Xrl  
    u "0{) ,  
    "@G[:(BoB<  
    发射&损耗激光 Ch"wp/[  
    u> {aF{  
                                                                            
    _[6sr7H!  
    kkl'D!z2g  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 rj=as>6B  
    fu!T4{2  
                                                                                     }; '@'   
    3D STED 轮廓 }b1G21Dc!  
    HYdM1s6vo  
                   V(`]hH0;T  
                                                        
    g (w/  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 J 1w[gf]J  
    XUP{]w`.Z  
    受激发射损耗效应                                                                           }d%CZnY&7  
    m"!SyN}&9?  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 $@Vn+| Ix  
    V|YQhd0kv  
    [5&k{*}}  
    nD5wN~[J  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           Au2?f~#Fv  
    m7k }k)  
    mu\1hKq;B  
                                                                                     Z1fY' f  
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