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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    离线infotek
    科学家
     
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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 UwxrYouv~@  
    6hm6h7$F1  
     C!" .[3  
                                                                           &U/~*{  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 IyA8+N y  
    (gv ~Vq  
    任务说明                                                                           zuZlP  
    ETVT.R8   
     xR;-qSl7Ms  
    Q,`Y  
    多重光源                                                                           wen6"  
       9qQFIw~S  
     qz:_T  
     ^5~[G%G4  
    螺旋相位板                                                                           VI`x fmVOQ  
    T {lJ[M  
     ]g; K_>@  
    MPd#C*c  
    探测器插件                                                                           uQ.VW/>  
    ;nJCd1H  
     @]h#T4z'  
    w,.Hdd6  
    参数运行 ~qT+sc!t  
    uL4@e  
                                                                                 m"vV=6m|\  
    Swua dN  
    为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： KXFa<^\o  
    k\}qCDs  
    Usage of the Parameter Run Document 3^us;aOr  
                                                                                     zj;y`ENj  
    非时序建模 &[KFCn  
    Q\:'gx8`  
                                                                               m%E7V{t  
    i9)y|  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 `czXjZE  
    ()>\D  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing |R*fw(=W  
                                                                                     Ck.GN<#-^P  
    总结 – 组件…           Ec6{?\  
    1|cmmUM-'v  
                                                                     TniZ!ud  
    ^j=_=Km]  
    {hRAR8  
     hoeTJ/;dm  
    系统观感 D\V}Eo';6  
    1 )j%]zd2  
                                                                         =8dCk\/  
    g}qK$>EPS  
    D0k7)\puQ  
    发射&损耗激光 M3F8@|2  
    ]@?3,N  
                                                                                 >k\*NW  
    km<~H w>Z  
    光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 3nK'yC  
    G%kXr$?W  
                                                                                     KQ9:lJKr  
    3D STED 轮廓 up2%QbN(  
    iKS9Xss8  
                   d) o<R;F  
                                                             %r!#  
    注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 a* IJ)'S  
    ?n@PZL= ]  
    受激发射损耗效应                                                                           [bOy, ^@4  
    v*BA\&  
    为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 nC&rQQFF  
    MB |(,{S  
    X}usyO'pW  
     Mm[%v t40  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           nf G:4k,  
    G+g`=7  
     mifYk>J^9  
                                                                                     n'h )(^  
    文件信息 \iE'E  
    [X~X?By>  
    <0LB]zDWe6  
     1[Mr2@  
    进一步阅读 R\Q%_~1  
    • Simulation of Multiple Light Source in VLF     !eTS PM  
    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy G#*!)#M <  
    ntkinbbD  
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    ^LcI6 h  
     T i/iD2g  
     
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