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    [产品]受激发射损耗(STED)显微镜原理 [复制链接]

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    只看楼主 倒序阅读 楼主  发表于: 2023-09-04
    摘要 <-UOISyf  
    lEPAP|~uw  
    N0n^L|(R  
                                                                      
    DhI>p0* T  
    受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 =He. fEy  
    <Wl(9$  
    任务说明                                                                           'ul\Q `N3  
    ;52'}%5  
    *i$ePVU  
    H L<s@kEZ  
    多重光源                                                                           _-cK{  
       ,D80/2U^  
    c\cZ]RZ  
    v4*rPGv  
    螺旋相位板                                                                           )_jSG5k  
    1 [z'G)v  
    `GQ{*_-  
    OQlG+|  
    探测器插件                                                                           9x~-*8aw  
    j?(!^ _!m  
    |bZM/U=  
    U;xF#e  
    参数运行 s[3fqdLP&  
    ySdN;d:q  
                                                                            
    j!#O G  
    ~hN~>0O  
    为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: Sm3u/w!  
    ;~zNqdlH  
    Usage of the Parameter Run Document xc'vS>&  
                                                                                     ;Fl<v@9  
    非时序建模 X=p"5hhfn  
    &hZwZgV +3  
                                                                          
    )JgC$ <  
    yOHXY&  
    将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 &m{'nRU}c  
    z YDK $  
    Channel Setting for Non-Sequential Tracing rjojG59U>  
                                                                                     X} JOX9pK  
    总结 – 组件…           Yx?aC!5M  
    6p<`h^  
                                                                
    W=-|`  
    2M6dMvS  
    9zKBO* p`  
    |w)5;uQ&\  
    系统观感 k&s; {|!  
    -6EK#!+  
                                                                    
    [ x>  
    $Tl<V/  
    d!{7r7ob\  
    发射&损耗激光 CJ w$j`k  
    Y_H/3?b%  
                                                                            
    `<vxG4=62\  
    Q</h-skLZ  
    光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 sB7" 0M  
    {7#03k  
                                                                                     ubGs/Vzye  
    3D STED 轮廓 D\rmaF+  
    `1'5j "v  
                   l)@:T|)c  
                                                        
    fGu!M9qN4  
    注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 IcoowZZ   
    Gt^d;7x]  
    受激发射损耗效应                                                                           79ZxqvB\  
    ju{%'D!d9  
    为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 pC^[[5A  
    jXcNAl  
    cC6z,0`3  
    #EwK"S~  
    VirtualLab Fusion 技术                                                                           __)qw#  
    6Y?`=kAp  
    cf*zejbw  
                                                                                     dB)9K)  
    文件信息 sc xLB;  
    ^5)_wUf  
    76MsrOv55  
    {8m1dEC^@Q  
    进一步阅读 ks:{TA27  
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    • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy j.& ;c'V$.  
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