结合显微镜技术创造出更强大的成像设备

如果你想象自己通过显微镜凝视，你可能会想象用变形虫，或者人类细胞，甚至是某种小昆虫看着载玻片。 :66xrw  
G9.
+N~GZ.  
但是显微镜能看到的远不止这些小生物，加州理工学院开发的一种新型显微镜使人们更容易看到构成生物的分子。 0i2ZgOJ  
g_\U-pzr  
在发表在《自然光子学》杂志上的一篇论文中，来自传统医学研究所化学助理教授兼研究员陆伟实验室的研究人员展示了他们所谓的键选择性荧光检测红外激发光谱显微镜或BonFIRE。 jj,Y:  
U[1Ir92:  
BonFIRE将两种显微镜技术结合到一个过程中，具有更高的选择性和灵敏度，使研究人员能够在前所未有的单分子水平上可视化生物过程，并从分子角度了解生物学机制。 Q]7Rqslz  
`gIlS^Q  
研究合著者和化学工程研究生Dongkwan Lee说：“使用我们的新显微镜，我们现在可以用振动对比可视化单个分子，这对于现有技术来说是具有挑战性的”。 .R/`Y)4  
T.vkGB=QZ%  
BonFIRE涉及的一项技术是荧光显微镜，它通过用荧光化学标记物标记分子和其他微观结构来成像，使它们在成像时发光。 t'bzhPQO)f  
F^Yt\V~T  
D=U"L-rRs  
另一种技术是振动显微镜，它利用将分子原子结合在一起的键中的自然振动。待成像的样品被光轰击，在这种情况下是红外光。这种轰击导致材料分子的键以可以识别其类型的方式振动。例如，三键的振动“听起来”与单个键的振动不同，例如，一个碳原子与另一个碳原子键合的振动听起来与与氮原子键合的碳原子的振动不同。这与训练有素的吉他手如何通过听它发出的音色来判断吉他上的哪根弦以及它是由什么材料制成的。 0^VA,QkQ\  
)E<<
  
Wei说，荧光显微镜可以让研究人员观察单个分子，但它不能提供丰富的化学信息。另一方面，振动显微镜提供了丰富的化学信息，但只有在被成像的分子大量存在时才有效。 xeqAFq=9?  
S.bB.<  
BonFIRE通过将振动与荧光耦合来绕过这些限制，有效地结合了这两种技术的优势。该过程的工作原理是这样的：首先用荧光染料染色样品，该染料与要成像的分子结合。然后，样品被红外光脉冲轰击，红外光的频率被调谐以激发该染料中发现的特定键。一旦键被该光的单个光子激发，第二个高能光脉冲就会照射在它上面，并激发它发出荧光，并发出可以被显微镜检测到的光芒。通过这种方式，显微镜可以对整个细胞或单个分子进行成像。 $F!)S
  
rULrGoM  
研究合著者和化学博士后学者研究助理Haomin Wang说：“我们对这种光谱学过程着迷，并很高兴将其变成现代生物成像的新工具。在过去的三年里，我们一直在冒险构建我们的定制BonFIRE显微镜，并对这种光谱过程有了更深入的了解，这进一步帮助我们优化了设置中的每个组件，以达到我们现在的性能。” tl|Qw";I  

Dz4fP;n  
在他们的论文中，研究人员还展示了用“颜色”标记生物分子的能力，使它们能够相互区分。这是通过使用构成染料分子的原子的几种同位素来完成的。（同位素是具有不同原子量元素的形式，因为它们的原子核具有更大或更少的中子）。它们的键振动的频率随着原子质量的增加或减少而变化。 xyK_1n@b  
je6H}eWTC6  
Wei说：“与一次只能区分少数颜色的传统荧光显微镜不同，BonFIRE使用红外光激发不同的化学键并产生彩虹般的振动颜色。你可以一次标记和成像来自同一样品的许多不同靶标，并以惊人的细节揭示生命的分子多样性。我们希望能够在不久的将来在活细胞中展示数十种颜色的成像能力。” t =ErJ  
_C3l2v'I$  
其他合著者是化学研究生Yulu Cao，Xiaotian Bi，Jiajun Du和Kun Miao。 tkBp?Wl  
uUXvBA?l  
相关链接：https://phys.org/news/2023-06-microscopy-techniques-combine-powerful-imaging.html