荧光显微镜入射光和荧光焦点不重合的问题

各位光学大牛，小弟做的实验是：   激光入射在焦点激发物质的荧光   然后在CCD上看到该荧光点

可是显微镜系统存在一个问题：  荧光焦点不重合
就是成像平面与入射光焦点不重合  ，看到一个个点的时候  入射光是很大的一个光斑。。。。
哈哈  我表达能力不行  不知道大家明不明白我的意思

我已经在入射光前面加透镜  希望实现入射光斑最小与成像面   大概重合
请问如何确保们真正重合了呢？仅仅通过看光斑大小？