受激发射损耗(STED)显微镜原理

M_wj>NXZ   摘要 z"n7du}v   MM*B.y~TxZ   %|:Gn)8                                                                      pp#xN/V#a   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 uwcm%N;I"   ?B"k9+%5ej   任务说明                                                                           $6evK~   }9GD'N?4   #~(VOcRI   `H.~#$   多重光源                                                                           J7`fve      .BR2pf|R   Qt@_C*,P   W/3,vf1   螺旋相位板                                                                           KTm^0:V[Oy   (|EnRk-E   2|KgRk|!   Pde|$!Jo   探测器插件                                                                           q*|H*sS   &G)I|mv   kf8-#Q/ B   n\v;4ly^   参数运行 iz&$q]P8   xV_,R'l                                                                            fZqqU|tq   ' DZYN {}   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： \{HbL,s   (}W+W\.   Usage of the Parameter Run Document E,S[3+                                                                                    i:6`Rmz1.   非时序建模 J3F-Yl|   hmRnr=2N                                                                          7hs1S|   ;#F/2UgHB   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 "0Wi-52=V   eD h]uKg   Channel Setting for Non-Sequential Tracing OlW|qj                                                                                    x}Y   总结 – 组件…           TSGJ2u5ie%   h%9>js^~                                                                TY(B]Q_o   6zm t^U    \(ygdZ{R   ,cgFdOM.   系统观感 yqaLqZ$   7,MDFO{ n                                                                    iP7 Cku}l   Gb=pQ(n4   c>_tV3TDA   发射&损耗激光 >UUcKq1M:   \~sc6ho                                                                            RZ(*%b<C   laRcEXj   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 7#~v<M6   F/ZB%;O9                                                                                    @%(Vi!Cv"R   3D STED 轮廓 :~I^ni   ~AVn$];{                  j20/Q)=h                                                        Zj+S"`P   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 n~1F[ *   Q]JWWKt6rV   受激发射损耗效应                                                                           `-R-O@X|   `D44I;e^1;   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 p?uk|C2   m\4V;F   R`[jkJrc   mH1T|UI   VirtualLab Fusion 技术                                                                           6:fHPlqW   Dq [f   ;6 ?a8t@                                                                                    prHM}n{0   文件信息 rr@h9bak;g   ,Wv@D"4?   !lVOZ%   &z;b X-"E   进一步阅读 GI se|[p   • Simulation of Multiple Light Source in VLF </hv{<   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy ty"|yA   %Z8'h\|   市场图片 e(=() :4is   B \73Vf

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