受激发射损耗(STED)显微镜原理

R;f!s/^)   摘要 IXugnvyV   W@1Nit-R   (<pc4#B@*                                                                      J]~LmSh   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 l=ZhHON   0*q&)   任务说明                                                                           Z| Z447_   ~w'M8(   8|`4D 'Ln   K<KyX8$P0   多重光源                                                                           C9U~lcIS      <5A(rDij   l-"$ a8jn2   <Vr"   螺旋相位板                                                                           /v E>*x   bH&Cbme90-   3ADTYt".   HKCMK HR   探测器插件                                                                           U&|=dH]-   hp!UW   XS]=sfN   VC\43A,9   参数运行 GmB7@-[QA%   yK<%AV@v                                                                            H~1*`m   cejSGsW6q   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： oBQr6-nZ   $6T*\(;T@A   Usage of the Parameter Run Document zo&'2I                                                                                    |<P]yn   非时序建模 iK1<4 )    ;OQ{                                                                          [L8Bgw1   G:$wdT(u   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 !dYkvoQNn   <XX\4[wb   Channel Setting for Non-Sequential Tracing l~wx8 ,?G                                                                                    J_OIU#-B   总结 – 组件…           2:Q9gru   _) 2fXG!                                                                ZJ@M}-4O1   Q2iS0#   9`+c<j4/B   /Ws@YP   系统观感 0n|op:]BHM   V=BF"S;-'                                                                    qdrk.~_   ^)conSm   F_U3+J>   发射&损耗激光 f@+[ -yF   0~Ot                                                                            dX: (%_Mn   xWD=",0+   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 `h/j3fmX?   C] qY                                                                                    v_"p)4 &'   3D STED 轮廓 7-.YVM~R   u[dR*o0'                  DTk)Y-eQ                                                        Mb=vIk{Bf   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 P Ig)h-w?   o-Pa3L=   受激发射损耗效应                                                                           hS}?"ST|   UP}Ys*   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 i)g=Lew   ?2_Oa%M   \,i9m9;y   nVko]y   VirtualLab Fusion 技术                                                                           -bu.Ar-#;h   nellN}jYsM   Lnbbv  *                                                                                    |Xk'd@<   文件信息 fGHYs   \RyOexNZ   la>:%SD   A&rk5y;   进一步阅读 j|TcmZGO   • Simulation of Multiple Light Source in VLF [U Ro#   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy at ]=SA   0m$f9b|Q?   市场图片 <61T) 7   G < Z)y#

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