受激发射损耗(STED)显微镜原理

:N4t49i   摘要 &PYK8}pBk3   8ZM&(Lz7u   ="Ho%*@6                                                                      1*'HL#   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 X*/ho   Pv_Jm   任务说明                                                                           o U056   =t9\^RIx)?   :=u?Fqqws   N/%WsQp   多重光源                                                                           ^(vs.U^U<      sz:g,}~h   $ M`hh{ -   [@J/eWB   螺旋相位板                                                                           (.D~0a JU   nuk*.Su   AgS7J(^&3   a%kQl^I4   探测器插件                                                                           "e.jZcN*   {1UQ/_   Yw^m   _I@9HC 4   参数运行 SxOC1+Oy   ZCmgs4W!                                                                            l`oZ)?ur   QRHu3w   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： T ]t'39   f .Q\Z'S^   Usage of the Parameter Run Document S2HcG 1J                                                                                    @ [:ZS+1   非时序建模 XGYbnZ ~    1S{D6#bE                                                                          B2 >H_dmQ   'u*DA|HC   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 z@!`:'ak   U{2BVqM   Channel Setting for Non-Sequential Tracing @.$|w>>T                                                                                    BXtCSfY$   总结 – 组件…           b*a#<K$T_   IwQ"eUnK                                                                Y<N5# );f   >0/i[k-dk   |2O]R s   l4F%VR4KT   系统观感 - Ajo9H   Hx"ob_^'7                                                                    J1( 9QN[w   7%5z p|3   o_XflzC   发射&损耗激光 wxK X{Bs   pmuvg6@h                                                                            3O,+=?VK   a zCf   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 8<X#f !   JZ)RGSG i                                                                                    m8A#~i .   3D STED 轮廓 VEWi_;=J1   Fq0i`~L~                  ?9!6%]2D                                                        /Lfm&;   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 Z"/p,A9W9|   CS2Bo   受激发射损耗效应                                                                           wo4;n9@I   [$mHv,~   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 ?4+9fE<Q   umjt]Gu[   @Xt*Snd   f86XkECZ;`   VirtualLab Fusion 技术                                                                           j]{_ s"O   nr95YSH   p*< 0"0                                                                                    H=<S 9M   文件信息 :0Bq^G"ge   PY{ G [   Z-^LKe   Pr3qo4t.L   进一步阅读 =#;3Q~:Jl^   • Simulation of Multiple Light Source in VLF urbp#G/>   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy P@Hs`=   J=\HO8E6>   市场图片 dzARI`   `tBgH_$M

ZT'`hK_up

)B T