受激发射损耗(STED)显微镜原理

0Ba*"/U]t~   摘要 9Ib#A   u,~/oTgO   ,azBk`$iQr                                                                      vCX 54   受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术，以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中，两束激光—一束正常，一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应，与通常的显微镜技术(例如，宽视场显微镜)相比，后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中，介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应，在焦点区域采用等效孔径。 >}H3V]   8.WZC1N   任务说明                                                                           .QVN&UyZ   r}nz )=\Cj   ]L6[vJHx   +d!"Zy2|B   多重光源                                                                           _jWGwO      [6cF#_)*   \p.eY)>   Ja vSR1_   螺旋相位板                                                                           /0 2-0mNv   .dPy<6E   5}Z_A?gy   Xte"tf9(C   探测器插件                                                                           JRr'81\   1fMl8[!JLu   1ir~WFP   S; Fj9\2)I   参数运行 S;tv4JY   PblO?@~O                                                                            eKvQS}11   +'V ,z   为了实现焦点区域的z-扫描，可以执行参数运行。使用此工具，用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息，请参阅： b wqd`C   d$5\{YLy   Usage of the Parameter Run Document :{=2ih-}                                                                                    8~|tl,   非时序建模 ZTzh[2u*   \Xpq=2`                                                                          jM[]Uh   7N8a48$8   将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后，用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时，将对活动光路进行初步分析（通过所谓的Light Path Finder）。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 ~y" ^t@!E   "w&G1 kw5I   Channel Setting for Non-Sequential Tracing 1kczlTF                                                                                    aTFT'(O,   总结 – 组件…           oi\e[qE   q[ 5&                                                                -p*j9 z   3-4CGSX;X   I?X!v6   QLD ld[   系统观感 GF17oMi   <2ymfL-q                                                                    #xNXCBl]O   \(;X3h   $E6bu4I   发射&损耗激光 JXAH/N&i   Z"5ew U<?                                                                            E-i<^&E   !cA4erBP   光在焦点区域中的传播表明，来自损耗激光的光会产生环形光斑，其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争，这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 l~'NqmXe   4n}^1eQ9                                                                                    9 #)&   3D STED 轮廓 Zd<8c^@   cUD}SOW                  2>'/!/+R                                                        ]#P>wW   注意：由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应，我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 |YWX.-aeo   SwdUElEp   受激发射损耗效应                                                                           50HRgoP5Y   m$H(l4wB>   为了近似饱和损耗的影响，我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓（600nm 直径，25% 边缘）。通过系统传播回探测器平面表明，由于这个过程，光斑变得非常小。 o 4cqLMu   p?Jx2(%m   ;H`>jI$   >*e,+ok   VirtualLab Fusion 技术                                                                           $94l('B6H   .?LP$O=   <}t<A                                                                                    We:b1sZR   文件信息 I1fUV72   R^=[D#*]>   RJ~I?{yR0[   [.LbX`K:   进一步阅读 +@jX|   • Simulation of Multiple Light Source in VLF 'J(B{B7|   • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 65AG#O5R   D>m!R[!o   市场图片 N3?@CM^hHw   +5oK91o[y

xq\A TON

KV]8o
'