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infotek 2025-04-17 08:11

受激发射损耗(STED)显微镜原理

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摘要 L^zh|MEyzk  
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受激发射损耗(STED)显微镜描述了一种常用的技术,以实现在生物应用的超分辨率。在这种方法中,两束激光—一束正常,一束转变成甜甜圈模式—被叠加到荧光样品上。通过使用荧光过程的发射和损耗以及利用由此产生的饱和效应,与通常的显微镜技术(例如,宽视场显微镜)相比,后反射光显示出更高的分辨率。在本文档中,介绍了这种设备的基本设置。为了模拟饱和效应,在焦点区域采用等效孔径。 nt+OaXe5D  
i(OeE"YA  
任务说明                                                                           z{FFTb^B  
V#b=mp  
J3(E{w8Q  
UG=]8YY!  
多重光源                                                                           YaL:6[6  
   qE|syA9  
Y9>92#aME  
=Xg/[J%  
螺旋相位板                                                                           .c:h!-D;  
,Si{]y  
f0j]!g  
R&BWCC{  
探测器插件                                                                           vf$IF|  
qTN%9!0@9  
qv}ECQ  
:enR8MS  
参数运行 .}v" `>x  
."=%]l 0  
                                                                        
z#ki# o  
q*|Alrm  
为了实现焦点区域的z-扫描,可以执行参数运行。使用此工具,用户可以轻松改变整个光学系统的单个参数或一组参数。有关详细信息,请参阅: 2%L`b"9}V  
\@WVeFr  
Usage of the Parameter Run Document (ie%zrhS  
                                                                                 \/?J)k3H.  
非时序建模 `}KxzD  
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9Li*L&B)  
7s#8-i  
将通道配置模式切换设置为Manual Configuration后,用户可以为系统中的每个表面指定为模拟打开哪些通道。运行模拟时,将对活动光路进行初步分析(通过所谓的Light Path Finder)。然后引擎将沿着这些光路将场追踪到系统中存在的探测器。 N%xCyZ  
C}pm>(F~  
Channel Setting for Non-Sequential Tracing * 4Ldh}S!  
                                                                                 6% ofS8 [  
总结 – 组件…           86N,04  
4xr^4\ lk  
                                                             zfv@<'  
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系统观感 q(:L8nKT]  
"n` z`{<n  
                                                                
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!cYID \}S,  
rU&Y/  
发射&损耗激光 DAP/  
} O $]xB  
                                                                        
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YCh`V[0  
光在焦点区域中的传播表明,来自损耗激光的光会产生环形光斑,其中中心孔径小于发射激光的焦斑。由于两个光束在目标上的荧光过程中竞争,这导致信号激光的有效光束尺寸更小。 v-d"dC`  
S-88m/"]s  
                                                                                 sdg2^]|  
3D STED 轮廓 D@gC(&U/6  
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               i79$D:PcLa  
                                                    
(0b\%;}  
注意:由于这个简化的例子不包括实际的荧光效应,我们为了可视化目的对两个激光束进行了归一化。 S-q"'5>  
Yq6 @R|u  
受激发射损耗效应                                                                           ZxSFElDD]E  
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为了近似饱和损耗的影响,我们在焦点位置对发射激光的结果应用了孔径效应。孔径的参数大致基于损耗激光的焦点轮廓(600nm 直径,25% 边缘)。通过系统传播回探测器平面表明,由于这个过程,光斑变得非常小。 !zF0 7.(E  
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VirtualLab Fusion 技术                                                                           7$Z_'GJ]1C  
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文件信息 x0J W  
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进一步阅读 I <D7 Jj  
• Simulation of Multiple Light Source in VLF 03v+eT  
• Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy 6384$mT,S  
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