京都大学开发出探测单细胞光学信号传导途径新方法

日本京都大学Michiyuki Matsuda团队开发出在活体双光子（2P）光遗传学中，荧光共振能量转移（FRET）辅助的黄素蛋白的光活化技术。相关论文2019年9月9日在线发表在《自然—方法学》上。 :M)B#@ c=  
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研究人员介绍，现有的光学二聚体以优化信号传导为途径，但它们在体内的用途有限，部分原因是它们在2P激发下的低效活化。 -L>xVF-|:1  
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为了克服这一问题，研究人员开发了FRET辅助光活化技术，或称为FRAPA。在2P激发下，mTagBFP2有效地吸收能量并将能量转移到CRY2的发色团。基于结构引导工程，开发了具有40％FRET效率的嵌合蛋白，并命名为2P激活的CRY2或2paCRY2。2paCRY2用于开发名为2paRAF的RAF1激活系统。在表达2paRAF的三维培养细胞中，细胞外信号调节激酶（ERK）在单细胞分辨率下通过2P激发被有效激活。在表达2paRAF的小鼠的表皮细胞中也完成了ERK的光激活。他们进一步开发了mTFP1融合的LOV结构域，其表现出对2P激发的有效响应。总的来说，FRAPA将为体内单细胞光学信号传导途径控制铺平道路。 =$;i  
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原文链接：https://www.nature.com/articles/s41592-019-0541-5